Ανάπτυξη μεθόδου δεσμευτικής αναλύσεως για την ανίχνευση-προσδιορισμό βιομορίων σε βιολογικά δείγματα: ανίχνευση μεταλλάξεων του γονιδίου BRCA1 με μικροσυστοιχίες ολιγονουκλεοτιδίων και βιοαισθητήρα

Περίληψη

Στην παρούσα διατριβή πραγματοποιήθηκε ανάπτυξη ευαίσθητης, ταχείας και με υψηλή διακριτική ικανότητα μεθόδου για την ταυτόχρονη ανίχνευση των μεταλλάξεων 3099delT, R1751X, 5382insC, G1738R, 5586G>A, R1203X και 3741insA του ογκοκατασταλτικού γονιδίου BRCA1 μέσω υβριδισμού στερεάς φάσης με μικροσυστοιχίες ολιγονουκλεοτιδίων (ΟΝΤ) και βιοαισθητήρα. Η επιλογή των παραπάνω μεταλλάξεων βασίστηκε στο γεγονός ότι οι μεταλλάξεις αυτές καλύπτουν το 67% του συνόλου των σημειακών μεταλλάξεων (αντικαταστάσεις, απαλειφές και ενθέσεις) του γονιδίου BRCA1 σε Ελληνικές οικογένειες με υψηλό κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου μαστού ή/και ωοθηκών. Στα πλαίσια της ερευνητικής εργασίας για την επίτευξη των παραπάνω πραγματοποιήθηκε ανάπτυξη νέας μεθόδου ακινητοποίησης ΟΝΤ σε στερεές επιφάνειες που περιελάμβανε πρόσδεση συζευγμάτων στρεπταβιδίνης με βιοτινυλιωμένα ΟΝΤ (β-ΟΝΤ) σε επιφάνεια στην οποία είχε προσροφηθεί βιοτινυλιωμένη αλβουμίνη ορού βοός (β-BSA). Με τη μέθοδο που αναπτύχθηκε κατασκευάστηκαν μικροσυσ ...
περισσότερα

Περίληψη σε άλλη γλώσσα

In the context of this thesis a sensitive and rapid method characterized by high discrimination efficiency was developed for the simultaneous detection of BRCA1 tumour suppressor gene mutations 3099delT, R1751X, 5382insC, G1738R, 5586G>A, R1203X and 3741insA using the solid phase hybridization technique combined with oligonucleotide (ONT) microarrays and biosensor. The above mentioned mutations were selected since they cover the 67% of whole point mutations (substitutions, insertions and deletions) found in Greek families with breast or/and ovarian cancer history. To achieve this goal, a new method was developed for the immobilization of ONT on solid supports. This method was based on the binding of pre-formed conjugates of biotinylated ONT (b-ONT) with streptavidin on the solid support coated with b-BSA. Using the developed method, microarrays fabricated through the deposition of microspots presented higher surface density, hybridization efficiency and sensitivity (detection limit 6 x ...
περισσότερα

Όλα τα τεκμήρια στο ΕΑΔΔ προστατεύονται από πνευματικά δικαιώματα.

DOI
10.12681/eadd/23431
Διεύθυνση Handle
http://hdl.handle.net/10442/hedi/23431
ND
23431
Εναλλακτικός τίτλος
Development of binding analysis method for the detection-determination of biomolecules in biological samples: detection of BRCA1 gene mutations using oligonucleotide microarrays and biosensor
Συγγραφέας
Μαυρογιαννοπούλου, Ελισσάβετ (Πατρώνυμο: Δ.)
Ημερομηνία
2008
Ίδρυμα
Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών (ΕΚΠΑ). Σχολή Θετικών Επιστημών. Τμήμα Χημείας
Εξεταστική επιτροπή
Σιάφακα Αθανασία
Κακαμπάκος Σωτήριος
Κούππαρης Μιχαήλ
Γαλανοπούλου Κωνσταντίνα
Δημόπουλος Κωνσταντίνος
Γιαννουκάκος Δρακούλης
Βοργιάς Κωνσταντίνος
Επιστημονικό πεδίο
Φυσικές ΕπιστήμεςΧημεία
Λέξεις-κλειδιά
Γονίδιο προδιάθεσης καρκίνου μαστού και ωοθηκών; Μικροσυστοιχίες DNA; Βιοαισθητήρες DNA; Ανίχνευση μεταλλάξεων; Ακινητοποίηση ολιγονουκλεοτιδίων; Σύστημα βιοτίνης / στρεπταβιδίνης; Υβριδισμός στερεάς φάσης; Γενετικός έλεγχος
Χώρα
Ελλάδα
Γλώσσα
Ελληνικά
Άλλα στοιχεία
266 σ., εικ.
Στατιστικά χρήσης
ΠΡΟΒΟΛΕΣ
Αφορά στις μοναδικές επισκέψεις της διδακτορικής διατριβής για την χρονική περίοδο 07/2018 - 07/2023.
Πηγή: Google Analytics.
ΞΕΦΥΛΛΙΣΜΑΤΑ
Αφορά στο άνοιγμα του online αναγνώστη για την χρονική περίοδο 07/2018 - 07/2023.
Πηγή: Google Analytics.
ΜΕΤΑΦΟΡΤΩΣΕΙΣ
Αφορά στο σύνολο των μεταφορτώσων του αρχείου της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
ΧΡΗΣΤΕΣ
Αφορά στους συνδεδεμένους στο σύστημα χρήστες οι οποίοι έχουν αλληλεπιδράσει με τη διδακτορική διατριβή. Ως επί το πλείστον, αφορά τις μεταφορτώσεις.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
Σχετικές εγγραφές (με βάση τις επισκέψεις των χρηστών)