Μελέτη της έκφρασης των microRNA σε ασθενείς με υπερτροφική μυοκαρδιοπάθεια

Abstract

microRNAs (miRNAs) are small noncoding RNAs with a crucial role in the post-transcriptional regulation of gene expression. Several studies have shown that miRNAs are involved in the pathogenesis of cardiovascular diseases. Therefore, the potential use of miRNAs as biomarkers or targets for new therapies for a variety of cardiovascular diseases are areas of tremendous interest. The aim of this study was to measure plasma levels of miR-146a, miR-29a, miR-181c, miR-199a, miR-208a και miR-208b in patients with hypertrophic cardiomyopathy and normal controls and to correlate possible alterations in plasma miRNA levels with certain clinical and laboratory data from those patients. miR-146a-5p levels were analyzed in plasma samples from 50 patients with hypertrophic cardiomyopathy and 30 controls using Real time qPCR and specific TaqMan assays. Relative quantitation was performed using the 2-ΔΔCt method. The results of this study have shown that plasma levels of miR-146a was increased in patients with hypertrophic cardiomyopathy. Additionally, plasma levels of miR-146a correlate significantly with the presence of left ventricle outflow tract obstruction. The case of miR-29a underscores that hemolysis is a factor that could lead to pre-analytical errors in miRNA determination in plasma.

Τα microRNAs (miRNA) αποτελούν μικρά μη κωδικά μόρια RNA με σημαντικό ρόλο στη ρύθμιση της γονιδιακής έκφρασης σε μετα-μεταγραφικό επίπεδο. Πρόσφατα δεδομένα αναδεικνύουν ότι τα miRNAs εμπλέκονται στην παθογένεση αρκετών νοσημάτων του καρδιαγγειακού συστήματος. Στα πλαίσια αυτά υπάρχει έντονο ερευνητικό ενδιαφέρον για την πιθανή μελλοντική χρήση τους ως βιοδεικτών ή νέων θεραπευτικών στόχων. Σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να διερευνήσει τις μεταβολές στα επίπεδα των miR-146a, miR-29a, miR-181c, miR-199a, miR-208a και miR-208b στο πλάσμα ασθενών με υπερτροφική μυοκαρδιοπάθεια σε σχέση με υγιείς καθώς και να διερευνήσει την ύπαρξη συσχετίσεων μεταξύ των μεταβολών αυτών με κλινικά και εργαστηριακά δεδομένα. Στη μελέτη συμπεριελήφθησαν 50 ασθενείς με υπερτροφική μυοκαρδιοπάθεια καθώς και 30 υγιείς μάρτυρες. H μέτρηση των επιπέδων των miRNA έγινε με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης πραγματικού χρόνου με τη χρήση ειδικών ιχνηθετών Taqman. Για τη σχετική ποσοτικοποίηση ακολουθήθηκε η μέθοδος 2-ΔΔCt. Τα αποτελέσματα της μελέτης αυτής έδειξαν ότι οι ασθενείς με υπερτροφική μυοκαρδιοπάθεια παρουσιάζουν αύξηση των επιπέδων του miR-146a και μάλιστα η αύξηση αυτή σχετίζεται με την παρουσία απόφραξης στο χώρο εξόδου της αριστερής κοιλίας. Τέλος η μελέτη του miR-29a αναδεικνύει ότι η ύπαρξη αιμόλυσης αποτελεί ένα σημαντικό παράγοντα που μπορεί να επηρεάσει τη μέτρηση των επιπέδων των miRNA στο πλάσμα και να οδηγήσει σε εσφαλμένα αποτελέσματα.