Μεθοδολογία προσδιορισμού υπολειμμάτων γεωργικών φαρμάκων και βιοδραστικών ουσιών στο σουσάμι και βιοδιαθεσιμότητα συστατικών αυτού

Abstract

The goals of the present thesis were (1) the development of an analytical method for the determination of organochlorine insecticide residues in sesame seeds, (2) the development of an analytical method for the determination of sesame lignans and their metabolites in sesame, and (3) the study of some bioavailability parameters of those lignans. The analytical method for the determination of organochlorine insecticides is based on the technique of Microwave-Assisted Extraction. The extraction was carried out with 40 mL of an acetonitrile/water (95:5) mixture at 100 oC for 10 min. Compound detection was carried out by GC/MS. Method recoveries for all compounds were higher than 80% and LOQ values were in the range of 5-10 μg/kg. The analytical method for the determination of lignans in blood plasma consists of the enzymatic hydrolysis of the samples, the isolation of the lignans and the sample clean-up by the use of adsorbents, and the chromatographic determination by HPLC. Mean recoveries were in the range of 74-98% with RSD values lower than 11%. The study for the absorption of the lignans by the organism was carried out by the administration of experimental diets based on sesame seeds and its products to rats. It was noticed that lignan concentrations in plasma were dependent on the type of the experimental diet administered.

Οι στόχοι της παρούσας διατριβής ήταν (1) η ανάπτυξη μεθόδου για τον προσδιορισμό υπολειμμάτων οργανοχλωριωμένων εντομοκτόνων στο σουσαμόσπορο, (2) η ανάπτυξη μεθόδου για τον προσδιορισμό λιγνανίων του σουσαμιού και μεταβολιτών τους σε πλάσμα αίματος, και (3) η μελέτη παραμέτρων της βιοδιαθεσιμότητας των λιγνανίων αυτών σε πειραματόζωα. Η μέθοδος προσδιορισμού των οργανοχλωριωμένων εντομοκτόνων στηρίζεται στην τεχνική της Υποβοηθούμενης Εκχύλισης με Μικροκύματα. Η εκχύλιση πραγματοποιήθηκε με 40 mL διαλύματος ακετονιτριλίου/νερού σε αναλογία 95:5, στους 100 oC, για 10 λεπτά. Η ανίχνευση των ενώσεων πραγματοποιήθηκε με GC/MS. Οι ανακτήσεις της μεθόδου ήταν μεγαλύτερες από 80% για όλες τις ενώσεις ενώ το όριο ποσοτικού προσδιορισμού ήταν 5-10 μg/kg. Η μέθοδος προσδιορισμού των λιγνανίων στο πλάσμα αίματος συνίσταται στην ενζυμική υδρόλυση των δειγμάτων, στην απομόνωση των λιγνανίων και τον καθαρισμό του δείγματος με χρήση προσροφητικών υλικών και στο χρωματογραφικό προσδιορισμό των λιγνανίων με HPLC. Ο μέσος όρος των ανακτήσεων κυμάνθηκε από 74 έως 98% με σχετική τυπική απόκλιση μικρότερη από 11%. Η μελέτη της απορρόφησης των λιγνανίων από τον οργανισμό πραγματοποιήθηκε με πειράματα χορήγησης πειραματικών τροφών βασισμένων στο σουσαμόσπορο και τα προϊόντα του και διαπιστώθηκε ότι η συγκέντρωση των λιγνανίων στο αίμα εξαρτάται από το είδος της πειραματικής τροφής που χορηγείται.