Επίδραση ενδοκρινικών διαταρακτών σε αναπαραγωγικές παραμέτρους στην όρνιθα

Abstract

In the present study, in-vivo and in-vitro experiments were carried out with the purpose of investigating the effect of endocrine disruptors on reproductive parameters of the hen, as well as, in the immune response of the organism from LPS-induced activation. In in-vivo experiments, it was studied whether the administration of endocrine disruptors (fumonisin, deltamethrin, zearalenone, lindane and monensin) through food, affects the expression of TLRs, cytokines, HRs and of the AMH gene in the testis, in-vivo. During the in-vitro experiments, the study focused on the expression profile of HRs and the AMH gene in Sertoli and chick granulosa cells after incubation of the cells with FB1, EE2, LPS, combined FB1 and LPS and finally, combined EE2 and LPS. In addition, the expression profile of TLRs in chicken granulosa cells was studied after the incubation of the cells with FB1, EE2, LPS, combined FB1 and LPS and finally, combined EE2 and LPS. The two-way relationship between the reproductive and the immune system leads us to include the immune system in focus of endocrine disruptor research. The living organizations have a well-equipped system to deal with a microbiological invasion however, the disruption of this system can lead to the development of serious infectious diseases. To clarify the possible mechanisms by which endocrine disruptors activate the immune response, the expression profile of Toll-like Receptors (TLRs) genes was studied in the granulosa cells of the reproductive system of birds after incubation of the cells with endocrine disruptors (EE2 and fumo), and also the expression profile of Toll-like Receptors (TLRs) and cytokines in testicular tissue cells by administration of endocrine disruptors (fumonisin, deltamethrin, zearaleone, lindane and monensin) through food. EDCs may exacerbate the effects of infectious diseases because they disturb the balance of the immune system. The TLRs play a key role in the activation of innate immunity, recognizing specific pathogen molecular patterns (PAPMs), such as liposaccharides (LPS), resulting in activation of intracellular message transduction pathways, with a final result the activation of gene expression and the synthesis of cytokines, chemokines, endothelial adhesion molecules and other receptors that contribute to the organization of early immune response. To assess the effect of EDCs in innate immune function, we investigated the effects of EDCs, FB1 and EE2 on lipopolysaccharide-induced activation of TLRs expression in avian granulosa cells.

Στην παρούσα μελέτη πραγματοποιήθηκαν in vivo και in vitro πειραματισμοί με σκοπό τη διερεύνηση της επίδρασης των ενδοκρινικών διαταρακτών στις αναπαραγωγικές παραμέτρους της όρνιθας καθώς και στην ανοσολογική απόκριση του οργανισμού από την επαγόμενη ενεργοποίηση του LPS. Στους in vivo πειραματισμoύς, μελετήθηκε κατά πόσο η χορήγηση ενδοκρινικών διαταρακτών (φουμονισίνη, δελταμεθρίνη, ζεαραλενόνη, λινδάνιο και μονενσίνη) διαμέσου της τροφής επηρεάζει την έκφραση των TLRs, των κυτταροκινών, των HRs και του γονιδίου της ΑΜΗ στους όρχεις, in vivo. Κατά τους in vitro πειραματισμούς, μελετήθηκε το προφίλ έκφρασης των HRs και του γονιδίου της AMH στα Sertoli και κοκκώδη κύτταρα της όρνιθας μετά την επώαση των κυττάρων με FB1, ΕΕ2, LPS, συνδυαστικά FB1 και LPS και τέλος, συνδυαστικά ΕΕ2 και LPS. Επιπλέον, μελετήθηκε το προφίλ έκφρασης των TLRs στα κοκκώδη κύτταρα της όρνιθας μετά την επώαση των κυττάρων με FB1, ΕΕ2, LPS, συνδυαστικά FB1 και LPS και τέλος, συνδυαστικά ΕΕ2 και LPS. Η αμφίδρομη σχέση μεταξύ του αναπαραγωγικού και του ανοσοποιητικού συστήματος εντάσσουν και το ανοσοποιητικό σύστημα στο επίκεντρο των ερευνών σχετικά με τους ενδοκρινικούς διαταράκτες. Οι έμβιοι οργανισμοί διαθέτουν ένα καλά εξοπλισμένο σύστημα για την αντιμετώπιση μιας μικροβιολογικής εισβολής όμως, η διαταραχή αυτού του συστήματος μπορεί να οδηγήσει στην ανάπτυξη σοβαρών μολυσματικών ασθενειών. Για να διασαφηνιστούν οι πιθανοί μηχανισμοί με τους οποίους οι ενδοκρινικοί διαταράκτες ενεργοποιούν την ανοσολογική απόκριση, μελετήθηκε το προφίλ έκφρασης των γονιδίων Toll-like Receptors (TLRs) στα κοκκώδη κύτταρα του αναπαραγωγικού συστήματος των πτηνών μετά από επώαση των κυττάρων με ενδοκρινικούς διαταράκτες (EE2 και fumo), και επίσης το προφίλ έκφρασης των Toll-like Receptors (TLRs) και κυτοκινών σε κύτταρα του ιστού των όρχεων με χορήγηση ενδοκρινικών διαταρακτών (φουμονισίνη, δελταμεθρίνη, ζεαραλεόνη, λινδάνιο και μονενσίνη) διαμέσου της τροφής. Οι EDCs ενδέχεται να επιδεινώσουν τις συνέπειες από μολυσματικές ασθένειες διότι διαταράσσουν την ισσοροπία του ανοσοποιητικού συστήματος. Οι TLRs διαδραματίζουν καίριο ρόλο στην ενεργοποίηση της φυσικής ανοσίας αναγνωρίζοντας ειδικά μοριακά πρότυπα των παθογόνων (PAPMs), όπως για παράδειγμα τους λιποσακχαρίτες (LPS), με αποτέλεσμα την ενεργοποίηση ενδοκυτταρικών οδών μεταγωγής μηνυμάτων, καταλήγοντας στην ενεργοποίηση της γονιδιακής έκφρασης και στη σύνθεση κυτοκινών, χημειοκινών, ενδοθηλιακών μορίων προσκόλλησης και άλλων υποδοχέων που συμβάλλουν στην οργάνωση της πρώιμης ανοσολογικής απόκρισης. Για την αξιολόγηση της επίδρασης των EDCs στην έμφυτη λειτουργία του ανοσοποιητικού συστήματος, ερευνήσαμε τα αποτελέσματα των EDCs, FΒ1 και ΕΕ2 στην επαγόμενη από λιποπολυσακχαρίτη ενεργοποίηση της έκφρασης των TLRs στα κοκκώδη κύτταρα πτηνών.