Μελέτη των ενδοθηλιακών παραγόντων (σελεκτίνη, ρεσιστίνη, οιστραδιόλη, προγεστερόνη) και των δεικτών του οξειδωτικού stress ανάλογα με τα φαρμακευτικά πρωτόκολλα σε γυναίκες που υποβάλλονται σε εξωσωματική γονιμοποίηση

Abstract

Repeated implantation failure (RIF) after in vitro fertilization, represents one of the most upsetting problems in assisted reproductive technologies. Current research regarding the role of selectins, resistin and ROS are made in an effort to improve implantation rates as well as to find out the possible associations of these molecules with the reproductive outcome. The scientific literature investigates the influence of endothelial factors and ROS on the achievement of pregnancy. The current study refers to the changes of E-selectin, resistin and ROS levels in different time points in serum and follicular fluid of subfertile women undergoing COH during IVF, using both GnRH agonist and antagonist protocols. Thus, the aim of this study was to measure these levels as well as to compare the serum and follicular fluid levels of selectin, resistin and ROS between women undergoing COH protocol for IVF with GnRH agonist and antagonist. Furthermore the objective of the study was to identify the cut-off values of these molecules and clarify their relationship with the outcomes of IVF.Eighty-five cycles of IVF in 85 women with primary or secondary subfertility were analyzed. As subfertility factors were recognized the following: female (tubal infertility, ovulatory dysfunction and endometriosis), male as well as unexplained infertility.The levels of E-selectin, resistin and ROS were increased during COH, from day 1 of ovarian stimulation until oocyte retrieval (OR), irrespectively of the protocol used, with higher levels detected in the FF compared to serum, except from the day of OR, where levels were comparable.Resistin levels were lower in the FF of women receiving GnRH agonists, in contrary to the antagonist protocol. Interestingly, resistin levels before the initiation of COH were associated with clinical pregnancy rates, and this remained significant following adjustment for age, BMI and IVF protocol used. Moreover, ROC analysis identified those values of >13.5 ng/ml were associated with a 6 times greater odd of a clinical pregnancy.E-selectin serum levels were increased from day 1 of COH, reaching a peak on the day of OR, with values comparable to those detected in FF. These differences were found to be unrelated to the IVF protocol used. E-selectin appears to respond positively to the hormonal rise during COH, without being affected by pituitary suppression. Importantly, none of the values measured for E-selectin has been associated with the likelihood of pregnancy.ROS levels changed significantly at different time-points, but there was no difference according to IVF protocol. ROS levels had no prognostic value on pregnancy rates.

Οι σελεκτίνες, η ρεσιστίνη και οι παράγοντες οξειδωτικού stress έχουν αποτελέσει αντικείμενο έρευνας σε μία προσπάθεια βελτίωσης των ποσοστών εμφύτευσης. Στη διεθνή βιβλιογραφία αναφέρεται η συμβολή τους στην κατανόηση του φαινομένου της εμφύτευσης αλλά και στην εκτίμηση των αποτελεσμάτων της εξωσωματικής γονιμοποίησης. Η παρούσα μελέτη αναφέρεται στις μεταβολές της σελεκτίνης-Ε, της ρεσιστίνης, και των δεικτών του οξειδωτικού stress στον ορό του αίματος και στο ωοθυλακικό υγρό γυναικών που υποβάλλονται σε πρωτόκολλα ελεγχόμενης διέγερσης ωοθηκών για εξωσωματική γονιμοποίηση ανάλογα με τα φαρμακευτικά πρωτόκολλα. Σκοπός της είναι η σύγκριση των δυο τύπων πρωτοκόλλων αγωνιστών και ανταγωνιστών που χρησιμοποιούνται στους κύκλους εξωσωματικής γονιμοποίησης (IVF),ως προς τους ενδοθηλιακούς παράγοντες και τους δείκτες οξειδωτικού stress.Στη μελέτη αυτή συμπεριλήφθηκαν συνολικά 85 υπογόνιμα ζευγάρια / γυναίκες, οι οποίες υποβλήθηκαν σε εξωσωματική γονιμοποίηση IVF/ICSI εξαιτίας γυναικείας υπογονιμότητας (σαλπιγγικός παράγοντας, ανωοθυλακιορρηξία, ενδομητρίωση) ανδρικής ή και ανεξήγητης υπογονιμότητας. Όπως πρόεκυψε από τη μελέτη αυτή, τα επίπεδα και των τριών ουσιών παρουσίασαν μία αυξητική πορεία κατά τη διάρκεια της διέγερσης των ωοθηκών, ανεξάρτητα από το πρωτόκολλο που χρησιμοποιήθηκε, από την πρώτη ημέρα διέγερσης των ωοθηκών μέχρι την ωοληψία. Πιο αναλυτικά, υψηλότερα επίπεδα ανιχνεύτηκαν στο ωοθυλακικό υγρό σε σύγκριση με τον ορό του αίματος, με εξαίρεση την ημέρα της ωοληψίας όπου τα επίπεδα στο ωοθυλακικό υγρό και τον ορό ήταν συγκρίσιμα τόσο για τη Ε-σελεκτίνη όσο και για τη ρεσιστίνη και για τους παράγοντες ROS.Καθορίστηκαν οι τιμές αναφοράς (cut off points) για τη ρεσιστίνη, με κριτικό σημείο το επίπεδο των 13,5 ng/ml. Έτσι, γυναίκες με επίπεδα ρεσιστίνης > 13,5 είχαν έξι φορές μεγαλύτερη πιθανότητα επίτευξης κύησης σε σχέση με τις γυναίκες όπου είχαν τιμές ρεσιστίνης κάτω από αυτό το επίπεδο, ανεξάρτητα από την ηλικία της γυναίκας, το δείκτη μάζας σώματος (BMI) και το πρωτόκολλο που εφαρμόστηκε.Όσον αναφορά τη σελεκτίνη, τα επίπεδα της στον ορό παρουσιάζουν μία αυξητική πορεία, φθάνοντας το μέγιστο την ημέρα της ωοληψίας με τιμές συγκρίσιμες με εκείνες που ανιχνεύονται στο ωοθυλακικό υγρό, ανεξαρτήτου πρωτοκόλλου IVF. Έτσι, E-σελεκτίνη φαίνεται να ανταποκριθεί θετικά στην ορμονική διέγερση των ωοθηκών κατά τη διάρκεια της COH, χωρίς να επηρεάζεται από την καταστολή της υπόφυσης. Ωστόσο, καμία προγνωστική αξία ως προς την επίτευξη εγκυμοσύνης δεν ανευρέθηκε να έχει η σελεκτίνη-Ε.Τέλος, τα επίπεδα των δεικτών οξειδωτικού stress μεταβάλλονται επίσης στις διάφορες χρονικές τιμές των μετρήσεων με μία ανοδική πορεία χωρίς όμως να αλλάζουν με το πρωτόκολλο της IVF. Από τις επιμέρους αναλύσεις προκύπτει ότι ούτε οι παράγοντες ROS έχουν προγνωστική αξία για την επίτευξη εγκυμοσύνης.