Έκφραση των κλωντινών-1,4,5,7 και αποφραξίνης σε ασθενείς με ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα και συσχέτιση αυτών με κλινικοπαθολογοανατομικούς παράγοντες και με την επιβίωση των ασθενών

Abstract

SUMMARYBackground. Occludin and claudins are integral constituents of the Tight Junctions (TJs) and are deregulated in various malignancies, including hepatocellular carcinoma (HCC). This study aims to clarify whether claudins 1,4,5,7 and occludin expression profiles may be used as prognostic markers for overall survival and disease-free survival in HCC patients after hepatectomy. Design. The study included 67 hepatectomy specimens obtained from an equal number of patients with HCC who underwent partial hepatectomy in the University Hospital of Patras. Ten normal liver tissues were used as control group. The expression of claudins 1,4,5,7 and occludin in liver biopsies was assessed by immunochemistry. Clinicopathologic features were also determined for each case.Results. Expression of claudins 1,4,5,7 and occludin was significantly increased in HCC specimens in contrast to non-neoplastic liver specimens adjacent to HCC lesions and furthermore, their expression in non-neoplastic liver tissues was significantly higher than in normal controls (p<0.001) Moreover, there was a statistically significant association between low levels of claudin-4 and advanced tumor grade (p=0.03). Down regulated claudin-1 levels were associated with low overall survival in univariate survival analysis (p=0.049) and Kaplan Mayer analysis (p=0.04). Multivariate analysis showed that claudin-4 levels were an independent prognostic factor for survival prognosis (p=0.01). Moreover, downregulated claudin-4 expression was associated with increased recurrence rates and low disease- free survival rates, in univariate analysis (p=0.038), Kaplan Mayer plot (p=0.013) and multivariate analysis (p=0.013). Low levels of claudin-5 and high levels of claudin-7 levels were independent negative prognostic factors according to multivariate analysis (p=0.015 and 0.009 respectively).Conclusions. This study demonstrates that high expression of claudins-1,4,5 and downregulation of claudin-7 are positive prognostic markers associated with good outcome and increased survival rates. Moreover, claudin-4 increased levels may serve as an independent positive prognostic factor for low recurrence rates after hepatectomy.

ΠΕΡΙΛΗΨΗΕισαγωγή: Οι κλωντίνες και η αποφραξίνη αποτελούν δομικά συστατικά των πρωτεϊνών διακυτταρικών συνάψεων, οι οποίες αποδιοργανώνονται λειτουργικά σε διάφορα κακοήθη νεοπλάσματα, συμπεριλαμβανομένου και του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος (ΗΚΚ). Σκοπός: Στην μελέτη μας, διερευνήσαμε το κατά πόσο είναι εφικτή η κλινική χρήση των κλωντινών- 1,4,5,7 και της αποφραξίνης ως προγνωστικών δεικτών για την ολική επιβίωση και το διάστημα επιβίωσης ελεύθερο νόσου σε ασθενείς με ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα μετά από ηπατεκτομή.Μεθοδολογία: Στην μελέτη μας εξετάσαμε 67 βιοψίες ήπατος από 67 ασθενείς με διαγνωσμένο ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα που υπεβλήθησαν σε ηπατεκτομή για θεραπευτικούς λόγους στο Πανεπιστημιακό Γενικό Νοσοκομείο Πατρών. Δέκα βιοψίες φυσιολογικού ηπατικού ιστού χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες. Η έκφραση των κλωντινών-1,4,5,7 και της αποφραξίνης στους ηπατικούς ιστούς εκτιμήθηκε με τη χρήση ανοσοϊστοχημικής χρώσης. Παράλληλα, εξετάσθηκαν διάφοροι κλινικοπαθολογοανατομικούς παράγοντες για κάθε περιστατικό.Αποτελέσματα: Η έκφραση των κλωντινών-1,4,5,7 και της αποφραξίνης σε παρασκευάσματα ΗΚΚ ήταν αυξημένη σε στατιστικά σημαντικό βαθμό σε σύγκριση με μη νεοπλασματικούς ηπατικούς ιστούς παρακείμενους σε ΗΚΚ καθώς επίσης και σε σύγκριση με φυσιολογικούς ηπατικούς ιστούς (μάρτυρες).( p<0.001 σε κάθε περίπτωση). Επιπρόσθετα, ανευρέθη μια στατιστικά σημαντική συσχέτιση μεταξύ χαμηλών επιπέδων κλωντίνης-4 και χαμηλού βαθμού διαφοροποίησης ΗΚΚ (p=0.03). Τα ελαττωμένα επίπεδα της κλωντίνης-1 βρέθηκαν να σχετίζονται με μειωμένη ολική επιβίωση σε μήνες, στην μονοπαραγοντική cox regression ανάλυση (p=0.049) και στην Kaplan Meier ανάλυση(p=0.04). Η πολυπαραγοντική cox regression ανάλυση έδειξε ότι τα επίπεδα της κλωντίνης-4 αποτελούν ανεξάρτητο παράγοντα που σχετίζεται με την ολική επιβίωση (p=0.01). Eπίσης, τα ελαττωμένα επίπεδα έκφρασης της κλωντίνης-4 σχετίζονται με αυξημένο κίνδυνο υποτροπών και μειωμένο διάστημα επιβίωσης ελεύθερο νόσου στην μνοπαραγοντική ανάλυση (p=0.038), στις καμπύλες Kaplan Meier (p=0.013) και στην πολυπαραγοντική ανάλυση (p=0.013). Τα μειωμένα επίπεδα έκφρασης της κλωντίνης-5 τα αυξημένα επίπεδα έκφρασης της κλωντίνης-7, αποτελούν ανεξάρτητους αρνητικούς προγνωστικούς παράγοντες, σύμφωνα με τα αποτελέσματα της πολυπαραγοντικής ανάλυσης (p=0.015 και 0.009, αντίστοιχα).Συμπέρασμα: Η παρούσα μελέτη αποδεικνύει ότι τα υψηλά επίπεδα κλωντινών- 1,4,5 και τα μειωμένα επίπεδα έκφρασης της κλωντίνης-7 αποτελούν θετικούς προγνωστικούς παράγοντες και σχετίζονται με ευνοϊκή πρόγνωση και αυξημένο διάστημα επιβίωσης. Επιπλέον, τα υψηλά επίπεδα έκφρασης της κλωντίνης-4 μπορεί να χρησιμεύσουν ως ανεξάρτητος θετικός προγνωστικός παράγων για ελαττωμένο κίνδυνο υποτροπών ΗΚΚ μετά από ηπατεκτομή.