Δημιουργία ζώων μοντέλων για τη διερεύνηση του in vivo ρόλου της geminin: αδρανοποίηση του γονιδίου σε μύες με τη χρήση ολοδύναμων εμβρυονικών κυττάρων (knockout) και ιστοειδική υπερέκφραση σε διαγονιδιακούς μύες

Περίληψη

Στόχο της παρούσας διατριβής αποτέλεσε η διερεύνηση του in vivo ρόλου ενός αναστολέα του κυτταρικού κύκλου ονόματι Geminin που αλληλεπιδρά με σύμπλοκα αναδιοργάνωσης της δομής της χρωματίνης στη διαφοροποίηση και τον πολλαπλασιασμό του ανοσοποιητικού συστήματος. Χρησιμοποιώντας το σύστημα Cre-loxP, δημιουργήσαμε μύες που επιτρέπουν την υπό συνθήκη εξάλειψη (knockout) του γονιδίου της geminin, πλαισιώνοντας τα εξώνια τρία και τέσσερα του γονιδίου της με θέσεις IoxP σε pc3 εμβρυϊκά πολυδύναμα κύτταρα μυός. Τα κύτταρα ενέθηκαν στη συνέχεια σε βλαστοκύστεις για τη δημιουργία χιμαιρικών μυών που εκφράζουν την Cre ρεκομπινάση στη γαμετική σειρά. Από διασταυρώσεις των τελευταίων, δημιουργήθηκαν μύες που έφεραν το πλαισιωμένο με ΙοχΡ θέσεις αλληλόμορφο της Geminin (floxed-TKneo), καθώς επίσης και το πλήρες knockout (ΔGEM). Από διασταυρώσεις ΔGEM+/-μυών δεν προέκυψαν ομόζυγοι μύες για το ΔGEM αλληλόμορφο. Φαινοτυπική ανάλυση των ετερόζυγων ΔGEM μυών με κυτταρομετρία ροής ανέδειξε αύξηση των επι ...
περισσότερα

Περίληψη σε άλλη γλώσσα

In this thesis we wished to investigate the in vivo role of a cell cycle inhibitor named Geminin that interacts with chromatin remodeling complexes, in differentiation and cycle regulation of the immune system. Using Cre-loxP system, we generated conditional knockout mice for Geminin's gene, flanking exons three and four with ΙοχΡ sites in pc3 mouse embryonic stem cells. Targeted pc3 cells were injected into blastocysts for the generation of chimeric mice that expressed Cre recombinase in their germ line. Subsequent crosses of the latter to wild type mice generated heterozygote mice for the flanked by IoxP sites allele of Geminin ("floxed-TKneo") and the complete knockout allele of Geminin (ΔGEM) that was deprived of exons three and four. From ΔGEM+/- intercrosses we didn't recover any homozygote knockout mice. Phenotypic analysis of ΔGEM+/- mice by FACS revealed a dramatic increase in Thy1⁻¹/Β220⁻ cells from spleen and lymph nodes from ΔGEM +/- adult mice and a significant increase in ...
περισσότερα
Πρέπει να είστε εγγεγραμένος χρήστης για έχετε πρόσβαση σε όλες τις υπηρεσίες του ΕΑΔΔ  Είσοδος /Εγγραφή

Όλα τα τεκμήρια στο ΕΑΔΔ προστατεύονται από πνευματικά δικαιώματα.

Διεύθυνση Handle
http://hdl.handle.net/10442/hedi/29966
ND
29966
Εναλλακτικός τίτλος
Generation of animal models for the study of geminin's in vivo role: inactivation of geminin in mice using totipotent mouse embryonic stem cells (knockout) and tissue-specific overexpression of geminin in transgenic mice
Συγγραφέας
Κοταντάκη, Πανωρέα Αλέξανδρος
Ημερομηνία
2010
Ίδρυμα
Πανεπιστήμιο Πατρών. Σχολή Επιστημών Υγείας. Τμήμα Ιατρικής. Τομέας Βασικών Ιατρικών Επιστημών ΙΙ. Εργαστήριο Γενικής Φαρμακολογίας
Εξεταστική επιτροπή
Ταραβήρας Σταύρος
Φλωρδέλλης Χριστόδουλος
Βαράκης Ιωάννης
Αθανασιάδου Αγλαΐα
Κωστόπουλος Γεώργιος
Πέτρου Ελένη
Λυγερού Ζωή
Επιστημονικό πεδίο
Φυσικές Επιστήμες
Βιολογικές Επιστήμες
Γεωργικές Επιστήμες
Γεωργική Βιοτεχνολογία
Λέξεις-κλειδιά
Ζωικά μοντέλα; Γονιδιακή αδρανοποίηση in vivo; Ιστοειδική υπερέκφραση; Ανοσοποιητικό σύστημα; Cre-IoxP σύστημα; Μεταλλαξιγένεση με παγίδευση γονιδίων; Σύμπλεγμα SWI/SNF
Χώρα
Ελλάδα
Γλώσσα
Ελληνικά
Άλλα στοιχεία
292 σ., πιν., σχημ.