Χρωμοσωμικές ανωμαλίες, επιγενετικοί παράγοντες και μηχανισμοί ρετρομετάθεσης

Περίληψη

Μελετήσαμε την ικανότητα έκφρασης RNA και ρετρομετάθεσης του ρετροϊού HERV-K10 σε κύτταρα HeLa, A549 και H1299 και σε ανθρώπινα ωοκύτταρα. Ανιχνεύσαμε έκφραση RNA του σε υψηλά επίπεδα και κατασκευάσαμε ανασυνδυασμένους ελλειμματικούς ρετροϊούς σημασμένους με ειδική κασέτα ανίχνευσης της ρετρομετάθεσης που βασίζεται στην έκφραση της φθορισμογόνου πρωτεΐνης EGFP. Μετά από διαμόλυνση καρκινικών κυτταρικών σειρών με αυτούς και μικροένεσή τους σε άωρα ανθρώπινα ωοκύτταρα, μέσω μικροσκοπίας UV ανιχνεύσαμε γεγονότα ρετρομετάθεσης, τα οποία πιστοποιήθηκαν σε επίπεδο γονιδιώματος με PCR, ενώ επιπλέον με FACS μετρήθηκε η συχνότητα ρετρομεταθέσεων σε υψηλά επίπεδα ως και 38.3%. Υψηλή συχνότητα ρετρομετάθεσης συσχετίζεται με έντονες φαινοτυπικές αλλαγές, διαταραχές του κυτταρικού κύκλου με συσσώρευση κυττάρων στη G2/M και πολλαπλές θραύσεις στα χρωμοσώματα. Αποδείξαμε ότι τα γεγονότα ρετρομετάθεσης συμβαίνουν χάρη στην εξειδικευμένη δράση αντίστροφης μεταγραφάσης ειδικής για τα HERV-K10 που κωδικο ...
περισσότερα

Περίληψη σε άλλη γλώσσα

We have studied the RNA expression levels and retrotrasposition potential of HERV-K10 in cancer cell lines (HeLa, A549 and H1299) and immature human oocytes. We have detected high levels of expressed HERV-K10 RNA and constructed truncated recombinant retroviruses tagged with an EGFP gene-based retrotransposition cassette for the detection of retrotransposition events. Cancer cell lines were transfected and immature human oocytes were microinjected with the recombinant construct. We detected retrotransposition events through EGFP-positive cells, further confirmed in the genome by PCR analysis. Using FACS, measured retrotransposition frequency was found at high levels up to 38.3%. High retrotransposition levels are related to phenotypic changes of the cells, cell cycle disturbance with cease of cells in G2/M phase and multiple chromosomal breaks. We have also shown that retrotransposition events take place due to the expression of a HERV-K10-specific RT encoded by endogenous elements. Ou ...
περισσότερα

Όλα τα τεκμήρια στο ΕΑΔΔ προστατεύονται από πνευματικά δικαιώματα.

DOI
10.12681/eadd/28110
Διεύθυνση Handle
http://hdl.handle.net/10442/hedi/28110
ND
28110
Εναλλακτικός τίτλος
Chromosomal aberrations, epigentic factors and retrotransposition mechanisms
Συγγραφέας
Δημητριάδου, Ευτυχία (Πατρώνυμο: Στέφανος)
Ημερομηνία
2011
Ίδρυμα
Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Ιατρικής. Τμήμα Ιατρικής. Τομέας Λειτουργικός - Κλινικοεργαστηριακός. Εργαστήριο Γενικής Βιολογίας
Εξεταστική επιτροπή
Σύρρου Μαρίκα
Σοφικίτης Νικόλαος
Τζαβάρας Θεόδωρος
Γεωργάτος Σπυρίδων
Αγγελίδης Χαράλαμπος
Καλανταρίδου Σοφία
Κωλέττας Ευάγγελος
Επιστημονικό πεδίο
Ιατρική και Επιστήμες Υγείας
Ιατρική Βιοτεχνολογία
Λέξεις-κλειδιά
Ρετρομετάθεση; Ρετρομετάθετα στοιχεία VL30; Ενδογενείς ρετροϊοί; Καρκινικές κυτταρικές σειρές; Μεθυλίωση; Γονιδιωματική αποτύπωση; Προεμφυτευτική γενετική διάγνωση; Υπογονιμότητα
Χώρα
Ελλάδα
Γλώσσα
Ελληνικά
Άλλα στοιχεία
πιν., σχημ.
Στατιστικά χρήσης
ΠΡΟΒΟΛΕΣ
Αφορά στις μοναδικές επισκέψεις της διδακτορικής διατριβής για την χρονική περίοδο 07/2018 - 07/2023.
Πηγή: Google Analytics.
ΞΕΦΥΛΛΙΣΜΑΤΑ
Αφορά στο άνοιγμα του online αναγνώστη για την χρονική περίοδο 07/2018 - 07/2023.
Πηγή: Google Analytics.
ΜΕΤΑΦΟΡΤΩΣΕΙΣ
Αφορά στο σύνολο των μεταφορτώσων του αρχείου της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
ΧΡΗΣΤΕΣ
Αφορά στους συνδεδεμένους στο σύστημα χρήστες οι οποίοι έχουν αλληλεπιδράσει με τη διδακτορική διατριβή. Ως επί το πλείστον, αφορά τις μεταφορτώσεις.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
Σχετικές εγγραφές (με βάση τις επισκέψεις των χρηστών)