Χρήση μοριακών εργαλείων για τη μελέτη της καταλυτικής εξειδίκευσης των εστερασών του φερουλικού οξέος

Περίληψη

Στην παρούσα διδακτορική διατριβή μελετήθηκαν τόσο σε μοριακό όσο και σε βιοχημικό επίπεδο δύο εστεράσες του φερουλικού οξέος των ημικυτταρινών από δύο ευκαρυωτικούς μικροοργανισμούς, το μεσόφιλο μύκητα Fusarium oxysporum και το θερμόφιλο μύκητα Sporotrichum thermophile.Αρχικά, πραγματοποιήθηκε in silico ανάλυση των γονιδιωμάτων των παραπάνω μικροοργανισμών και στη συνέχεια των αλληλουχιών των εστερασών του φερουλικού οξέος που συναντώνται σε αυτούς. Οι αλληλουχίες δύο γονιδίων που κωδικοποιούν για εστεράσες του φερουλικού οξέος απομονώθηκαν και πολλαπλασιάστηκαν με τη βοήθεια αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης και έπειτα κλωνοποιήθηκαν και εκφράστηκαν λειτουργικά μέσω του συστήματος έκφρασης του μεθυλότροφου ζυμομύκητα Pichia pastoris Χ33. Επιπλέον, μελετήθηκαν οι φυσικοχημικές ιδιότητες των ανασυνδυασμένων ενζύμων που παρήχθησαν, FoFaeC και StFaeB. H ίδια διαδικασία ακολουθήθηκε για μια τρίτη ημικυτταρινάση, την ξυλανάση FoXyn11 της οικογένειας 11 των γλυκοζυλ-υδρολασών από το F. oxys ...
περισσότερα

Περίληψη σε άλλη γλώσσα

The present PhD thesis focuses on the molecular and biochemical study of the ferulic acid esterases of hemicellulose by two eukaryotic microorganisms, the mesophilic fungus Fusarium oxysporum and the thermophilic fungus Sporotrichum thermophile.An in silico analysis of the microorganism genomes followed by esterase of ferulic acid sequences analysis were held. The sequences of two genes coding for ferulic acid esterases were isolated and amplified using polymerase chain reaction and then cloned and functionally expressed in the expression system of methylotrophic yeast Pichia pastoris X33. Furthermore, the physicochemical properties of the produced recombinant enzymes FoFaeC and StFaeB, were studied. The same procedure was followed using a third hemicellulose, xylanase FoXyn11, member of fungal glycosyl-hydrolase family 11 from F. oxysporum and the production enhancement of the enzymes FoFaeC and FoXyn11 was successfully carried out by optimizing the P. pastoris fermentation conditions ...
περισσότερα

Όλα τα τεκμήρια στο ΕΑΔΔ προστατεύονται από πνευματικά δικαιώματα.

DOI
10.12681/eadd/27490
Διεύθυνση Handle
http://hdl.handle.net/10442/hedi/27490
ND
27490
Εναλλακτικός τίτλος
Study of ferulic acid esterases catalytic specificity using molecular tools
Συγγραφέας
Μουκούλη, Μαρία του Δημήτριος
Ημερομηνία
2012
Ίδρυμα
Εθνικό Μετσόβιο Πολυτεχνείο (ΕΜΠ). Σχολή Χημικών Μηχανικών. Τομέας Σύνθεσης και Ανάπτυξης Βιομηχανικών Διαδικασιών. Εργαστήριο Βιοτεχνολογίας
Εξεταστική επιτροπή
Χριστακόπουλος Παύλος
Κέκος Δημήτριος
Χατζηνικολάου Δημήτριος
Κολίσης Φραγκίσκος
Λυμπεράτος Γεράσιμος
Ταούκης Πέτρος
Χαμηλάκης Στυλιανός
Επιστημονικό πεδίο
Επιστήμες Μηχανικού και ΤεχνολογίαΕπιστήμη Χημικού Μηχανικού
Λέξεις-κλειδιά
Εστεράσες του φερουλικού οξέος; Φερουλικό οξύ; Ημικυτταρίνη; Ημικυτταρινάσες; Ξυλανάσες; Αραβινοξυλάνη; Υπερέκφραση πρωτεϊνών; Καταλυτική εξειδίκευση
Χώρα
Ελλάδα
Γλώσσα
Ελληνικά
Άλλα στοιχεία
iv, 306 σ., εικ., πιν., σχημ., γραφ.
Στατιστικά χρήσης
ΠΡΟΒΟΛΕΣ
Αφορά στις μοναδικές επισκέψεις της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Google Analytics.
ΞΕΦΥΛΛΙΣΜΑΤΑ
Αφορά στο άνοιγμα του online αναγνώστη.
Πηγή: Google Analytics.
ΜΕΤΑΦΟΡΤΩΣΕΙΣ
Αφορά στο σύνολο των μεταφορτώσων του αρχείου της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
ΧΡΗΣΤΕΣ
Αφορά στις μοναδικές επισκέψεις της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.