ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΤΕΤΑΡΤΟΤΑΓΟΥΣ ΔΟΜΗΣ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΤΩΝ ΓΛΥΚΟΚΟΡΤΙΚΟΕΙΔΩΝ

Abstract

ΣΤΗΝ ΕΡΓΑΣΙΑ ΑΥΤΗ ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΕ Η ΤΕΤΑΡΤΟΤΑΓΗΣ ΔΟΜΗ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΤΩΝ ΓΛΥΚΟΚΟΡΤΙΚΟΕΙΔΩΝ ΜΕ ΤΗΝ ΜΕΘΟΔΟ ΤΗΣ ΧΗΜΙΚΗΣ ΣΥΝΔΕΣΗΣ ΤΩΝ ΥΠΟΜΟΝΑΔΩΝ ΤΟΥ ΣΕ ΚΥΤΟΣΟΛΙΟ ΚΑΙ ΣΕ ΑΘΙΚΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ. ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΜΕΤΑ ΤΗΝ ΧΗΜΙΚΗ ΣΥΝΔΕΣΗ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΘΗΚΕ ΠΟΛΥΚΛΩΝΟ ΑΝΤΙΣΩΜΑ. Η ΧΗΜΙΚΗ ΣΥΝΔΕΣΗ ΣΕ ΚΥΤΟΣΟΛΙΟ ΚΑΙ ΣΕ ΑΘΙΚΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΕΔΕΙΞΕ ΟΤΙ ΤΡΕΙΣ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΜΕ ΜΒ: 91, 57 ΚΑΙ 14 KDA ΕΙΝΑΙ ΣΥΝΔΕΔΕΜΕΝΕΣ ΜΕ ΤΟΝ ΥΠΟΔΟΧΕΑ. Η ΠΡΩΤΕΙΝΗ ΜΕ ΜΒ: 90 KDΑ ΕΠΙΒΕΒΑΙΩΘΗΚΕ ΟΤΙ ΕΙΝΑΙ Η HEAT-SHOCK ΠΡΩΤΕΙΝΗΜΕ ΜΒ: 90 KDA (HSP 90) ΜΕ ΤΗΝ ΜΕΘΟΔΟ ΤΗΣ ΑΝΟΣΟΧΗΜΙΚΗΣ ΑΝΑΛΥΣΗΣ ΠΡΩΤΕΙΝΩΝ ΜΕΤΑ ΑΠΟ ΜΕΤΑΦΟΡΑ ΣΕ ΝΙΤΡΟΚΥΤΤΑΡΙΝΗ. ΜΕΤΑ ΤΗΝ ΧΗΜΙΚΗ ΣΥΝΔΕΣΗ ΣΤΟ ΚΥΤΟΣΟΛΙΟ ΕΜΦΑΝΙΣΤΗΚΑΝ ΔΥΟ ΣΥΜΠΛΟΚΑ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΜΕ ΜΒ: 347 ΚΑΙ 288 KDA, ΤΟ ΟΠΟΙΟ ΣΗΜΑΙΝΕΙ ΟΤΙ Η ΠΡΩΤΕΙΝΗ ΜΕ ΜΒ: 57 KDA ΕΙΝΑΙ ΣΥΝΔΕΔΕΜΕΝΗ ΜΟΝΟ ΜΕ ΕΝΑ ΜΕΡΟΣ ΤΟΥ ΣΥΝΟΛΟΥ ΤΩΝ ΜΟΡΙΩΝ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ.

IN THE PRESENT STUDY WE HAVE INVESTIGATED THE SUBUNIT COMPOSITION OF THE UNTRANSFORMED RECEPTOR IN THE CYTOSOL AND IN THE INTACT CELLS, BY MEANS OF CHEMICAL CROSS-LINKING. THE ISOLATION OF THE CROSS-LINKED RECEPTOR WAS EFFECTED WITH A POLYCLONAL ANTIBODY THAT WE HAVE PREPARED. CROSS-LINKING IN CYTOSOL AND IN INTACTCELLS REVEALED THREE STEROID-BINDING PROTEIN ASSOCIATES, WITH MR: 91, 57 AND 14 KDA. THE 90 KDA PROTEIN WAS IDENTIFIED BY IMMUNOBLOTING WITH THE 90 KDA HEAT-SHOCK PROTEIN (HSP 90). BY TREATING THE CYTOSOLIC RECEPTOR WITH CROSS-LINKERS WE DETECTED TWO COMPLEXES WITH MR: 347 AND 288 KDA, SIGNIFYING THAT THE 57 KDA PROTEIN IS BOUND ONLY TO A FRACTION OF THE UNTRANSFORMED CYTOSOLIC RECEPTOR.