Νέες τεχνικές πρωτεϊνικής ανάλυσης

Περίληψη

Στο πρώτο μέρος της διδακτορικής διατριβής, αναπτύχθηκε μέθοδος παρασκευής συστοιχιών πρωτεϊνών, η οποία βασίζεται στην in vitro έκφραση μορίων DNA, που παράγονται με την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR). Με τον τρόπο αυτό, μια συστοιχία DNA μετατρέπεται σε συστοιχία πρωτεϊνών, παρακάμπτοντας τα χρονοβόρα στάδια της κλωνοποίησης των επιθυμητών αλληλουχιών cDNA, της in vivo έκφρασής τους και της απομόνωσης των πρωτεϊνών. Στη δεύτερη ενότητα περιγράφεται μια νέα, μη ραδιοϊσοτοπική μέθοδος για τη δοκιμασία πρόωρου τερματισμού της πρωτεϊνοσύνθεσης. Στην προτεινόμενη μέθοδο, με τη χρήση της PCR ως συνθετικό εργαλείο, ενσωματώθηκε καθοδικά της εξεταζόμενης αλληλουχίας DNA η κωδικοποιούσα αλληλουχία της φωτοπρωτεΐνης ακουορίνης, διατηρώντας το ίδιο πλαίσιο ανάγνωσης. Μετά από έκφραση in vitro του ανασυνδυασμένου μορίου DNA, πραγματοποιείται άμεσος έλεγχος της ολοκλήρωσης ή μη της πρωτεϊνοσύνθεσης, μέσω της αντίδρασης της ακουορίνης, αποφεύγοντας τα πολύωρα στάδια της ηλεκτροφόρησης και τ ...
περισσότερα

Περίληψη σε άλλη γλώσσα

In the first section of the present dissertation, a method is described for preparation of protein arrays. The method is based on the in vitro expression of recombinant DNA sequences, which are produced via the polymerase chain reaction (PCR). Thus, a DNA array is converted into a protein array, facilitating the steps required for the production and isolation of proteins for immobilization. The second section presents a new nonradioactive approach to the protein truncation test. PCR is used as a synthetic tool for introduction of sequences that allow in vitro expression of the interrogated DNA and for its fusion in-frame upstream of a sequence encoding the photoprotein aequorin. In the absence of a mutation, active aequorin is generated after in vitro expression of the recombinant DNA molecule. On the contrary, any mutation that causes premature termination of translation results in no aequorin production. Finally, it is developed a rapid method for the preparation of biotinylated biol ...
περισσότερα

Όλα τα τεκμήρια στο ΕΑΔΔ προστατεύονται από πνευματικά δικαιώματα.

DOI
10.12681/eadd/17749
Διεύθυνση Handle
http://hdl.handle.net/10442/hedi/17749
ND
17749
Εναλλακτικός τίτλος
Novel techniques for protein analysis
Συγγραφέας
Πετράκης, Ευάγγελος του Χριστόφορος
Ημερομηνία
2007
Ίδρυμα
Πανεπιστήμιο Πατρών. Σχολή Θετικών Επιστημών. Τμήμα Χημείας
Εξεταστική επιτροπή
Χριστόπουλος Θεόδωρος
Μοσχονάς Νικόλαος
Ιωάννου Πηνελόπη
Αλετράς Αλέξιος
Ζαρκάδης Ιωάννης
Traeger-Συνοδινού Joanne
Σκορίλας Ανδρέας
Επιστημονικό πεδίο
Φυσικές ΕπιστήμεςΧημεία
Λέξεις-κλειδιά
Συστοιχίες πρωτεϊνών; Μονονουκλεοτιδικοί πολυμορφισμοί; Δοκιμασία πρόωρου τερματισμού της πρωτεϊνοσύνθεσης; Βιοφωταυγείς πρωτεϊνες; Φωτοπρωτεϊνη ακουορίνη; Φωτοφεράση της πυγολαμπίδας; Φωτοφεράση της renilla; Συστήματα συζευγμένης μεταγραφής και μετάφρασης in vitro
Χώρα
Ελλάδα
Γλώσσα
Ελληνικά
Άλλα στοιχεία
230 σ., εικ.
Στατιστικά χρήσης
ΠΡΟΒΟΛΕΣ
Αφορά στις μοναδικές επισκέψεις της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Google Analytics.
ΞΕΦΥΛΛΙΣΜΑΤΑ
Αφορά στο άνοιγμα του online αναγνώστη.
Πηγή: Google Analytics.
ΜΕΤΑΦΟΡΤΩΣΕΙΣ
Αφορά στο σύνολο των μεταφορτώσων του αρχείου της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
ΧΡΗΣΤΕΣ
Αφορά στις μοναδικές επισκέψεις της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
Σχετικές εγγραφές (με βάση τις επισκέψεις των χρηστών)