Ο ρόλος των νευροπεπτιδίων στη φλεγμονή των εντερικών νευρικών πλεγμάτων σε ασθενείς με νόσο Crohn

Abstract

Background and Aim: The risk for postoperative recurrence following ileocolonic resection for Crohn's disease (CD) is high. Myenteric plexitis at the proximal resection margin is considered an established risk factor. Our primary purpose was to investigate the correlation of neuropeptide P (NPY), vasoactive intestinal peptide (VIP), and substance P (SP) levels of expression with the presence and severity of plexitis at the proximal resection margin. Secondary aims were to assess the predictive value of the above peptides’ immunohistochemical expression and to identify risk factors for postoperative recurrence. Materials and Methods: A retrospective, single-center study on patients with CD who underwent ileocolonic resection from January 2010 to December 2016 was conducted. Patients’ demographic, clinical, and surgical data were recorded, as well as the incidence of endoscopic, surgical and clinical recurrence. The presence and severity of plexitis was assessed by hematoxylin & eosin stain, separately for the myenteric and submucosal plexus. Giemsa stain was used to assess mast cell involvement. The detection of T lymphocytes and NPY-, VIP-, and SP-ergic neurons was performed by immunohistochemical methods. The expression of the examined peptides was digitalized and quantified by image analysis. Results: Seventy-nine patients (44 men) with a median age of 35 years and a median follow-up of 71 months were included. Myenteric and submucosal plexitis was present in 83.5% and 73.4% of cases, respectively. No correlation was found between the quantified expression of NPY, VIP and SP and the presence or severity of plexitis. Similarly, the number of involved T lymphocytes or mast cells was not related to the expression of the examined neuropeptides. Univariable and multivariable survival analysis (Cox proportional hazards regression) identified smoking (hazard ratio [HR] 4.07, 95% confidence interval [CI] 2.08–7.94, p<0.001), moderate (HR 3.68, 95%CI 1.06–12.73, p=0.040) and severe myenteric plexitis (HR 7.36, 95%CI 1.12–48.30, p=0.037) as independent risk factors for endoscopic recurrence. Smoking (HR 2.78, 95%CI 1.01–7.67, p=0.049), severe myenteric plexitis (HR 20.09, 95%CI 1.09–368.28, p=0.044) and involved proximal resection margin (HR 3.45, 95%CI 1.33–8.96, p=0.011) were independent predictors of clinical recurrence. Conclusions: In this study, no associations were detected between plexitis and the expression of specific neuropeptides. Smoking, myenteric plexitis, and a positive proximal resection margin were identified as independent risk factors for postoperative recurrence.

Υπόβαθρο και Σκοπός: Ο κίνδυνος μετεγχειρητικής υποτροπής έπειτα από ειλεοκολική εκτομή για νόσο Crohn (NC) είναι υψηλός. Η μυεντερική πλεγματίτιδα τους εγγύς ορίου εκτομής θεωρείται ένας αναγνωρισμένος παράγοντας κινδύνου. Ο πρωταρχικός σκοπός αυτής της μελέτης ήταν η διερεύνηση της συσχέτισης των επιπέδων έκφρασης του νευροπεπτιδίου P (NPY), του αγγειοδραστικού εντερικού πεπτιδίου (VIP), και της ουσίας P (SP) με την παρουσία και τη βαρύτητα της πλεγματίτιδας στο εγγύς όριο εκτομής. Δευτερεύοντες στόχοι ήταν η εκτίμηση της προγνωστικής αξίας της ανοσοϊστοχημικής έκφρασης των συγκεκριμένων νευροπεπτιδίων και η αναγνώριση παραγόντων κινδύνου για μετεγχειρητική υποτροπή. Υλικά και Μεθοδολογία: Πραγματοποιήθηκε αναδρομική, μονοκεντρική μελέτη ασθενών με ΝC που υποβλήθηκαν σε ειλεοκολική εκτομή από τον Ιανουάριο 2010 έως και τον Δεκέμβριο 2016. Καταγράφηκαν τα δημογραφικά, κλινικά και χειρουργικά δεδομένα των ασθενών, όπως επίσης και η ύπαρξη ενδοσκοπικής, κλινικής και χειρουργικής υποτροπής. Η αξιολόγηση της παρουσίας και βαρύτητας της πλεγματίτιδας έγινε με χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης, ξεχωριστά για το μυεντερικό και υποβλεννογόνιο πλέγμα. Η χρώση Giemsa χρησιμοποιήθηκε για την εκτίμηση της συμμετοχής μαστοκυττάρων. Η ανίχνευση Τ λεμφοκυττάρων και των ΝΡΥ-, VIP- και SP-εργικών νευρώνων πραγματοποιήθηκε με ανοσοϊστοχημικές μεθόδους. Η ανοσοέκφραση των πεπτιδίων ποσοτικοποιήθηκε χρησιμοποιώντας πρόγραμμα ψηφιακής ανάλυσης εικόνας. Αποτελέσματα: Συμπεριλήφθηκαν 79 ασθενείς (44 άνδρες) με διάμεση ηλικία τα 35 έτη και διάμεση παρακολούθηση 71 μηνών. Μυεντερική και υποβλεννογόνια πλεγματίτιδα διαπιστώθηκε στο 83.5% και 73.4% των περιπτώσεων, αντίστοιχα. Δεν ανιχνεύθηκε συσχέτιση μεταξύ της ανοσοέκφρασης των NPY, VIP και SP και της παρουσίας ή της βαρύτητας της πλεγματίτιδας. Παρομοίως, ο αριθμός των εμπλεκόμενων Τ λεμφοκυττάρων ή μαστοκυττάρων δεν συσχετίστηκε με την έκφραση των συγκεκριμένων νευροπεπτιδίων. Από τη μονοπαραγοντική και πολυπαραγοντική ανάλυση επιβίωσης (παλινδρόμηση αναλογικών κινδύνων Cox), το κάπνισμα (hazard ratio [HR] 4.07, 95% confidence interval [CI] 2.08–7.94, p<0,001), η μέτρια (HR 3.68, 95%CI 1.06–12.73, p=0.040) και σοβαρή μυεντερική πλεγματίτιδα (HR 7.36, 95%CI 1.12–48.30, p=0.037) αναδείχθηκαν ανεξάρτητοι παράγοντες κινδύνου για ενδοσκοπική υποτροπή, ενώ το κάπνισμα (HR 2.78, 95%CI 1.01–7.67, p=0.049), η σοβαρή μυεντερική πλεγματίτιδα (HR 20.09, 95%CI 1.09–368.28, p=0.044) και το θετικό εγγύς όριο εκτομής (HR 3.45, 95%CI 1.33–8.96, p=0.011) για κλινική υποτροπή. Συμπεράσματα: Στην παρούσα μελέτη δεν αναγνωρίστηκε κάποια συσχέτιση μεταξύ της πλεγματίτιδας και της έκφρασης συγκεκριμένων νευροπεπτιδίων. Το κάπνισμα, η μυεντερική πλεγματίτιδα και το θετικό εγγύς όριο εκτομής αναδείχθηκαν ως ανεξάρτητοι παράγοντες κινδύνου για μετεγχειρητική υποτροπή.