Αγγειογενετικοί παράγοντες (αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας, πλακουντιακός αυξητικός παράγοντας) στο αμνιακό υγρό δεύτερου τριμήνου κύησης

Abstract

AngiogenesisIn this first chapter, the role of angiogenesis in physiological and pathologicalcondititons is explained. The mechanism of angiogenesis and vasculogenesis as wellas their stages are also cited. This chapter describes the main angiogenic factors:VEGF, PIGF, FGF, IGF, TGF, PlGF.The two main types of angiogenesis are also described. These are the sproutingangiogenesis and the intussusceptive angiogenesis. The importance of angiogenesis inpathological conditions in cancer and in the ovarian hyperstimulation syndrome aswell as the role of therapeutic angiogenesis is also highlighted in this chapter.Finally, angiogenesis in pregnancy in all stages from conception until term as well asthe role of the main angiogenic factors are discussed.II. Pathological AngiogenesisThis chapter refers to angiogenesis which characterizes pathological pregnancies. In specific, the characteristics of angiogenesis in pregnancies complicated bypreeclampsia or IUGR and the differences compared with normal pregnancies andphysiological angiogenesis are highlighted. Amniotic FluidIn this chapter, the role of amniotic fluid and its abnormalities in normal andpathological pregnancies are discussed.IV. Angiogenesis and Amniotic FluidThis chapter analyzes the presence of the angiogenic factors and their receptors in theamniotic fluid. Several studies, which prove their presence in amniotic fluid andchanges in their concentrations during normal and pathological pregnancies are stated.The Specific part includes the following:I. Hypothesis and AimThis study was based on the hypothesis of a possible relation between angiogenicfactors (VEGF, PlGF) in the second trimester amniotic fluid and maternal, gestationaland neonatal characteristics. This relation has been proved studying these factors inmaternal plasma compared with the above parameters by Mijal et al. The aim of thestudy was also the detrmination of reference values of VEGF and PlGF inmidtrimetser amniotic fluid, which has not been investigated until today according tothe literature, to the best of our knowledge.II. Subjects and methodsThe Ethics Committee of our teaching hospital approved the study protocol. Writteninformed consent was obtained by all participants. Two hundred and twenty-sevenGreek women with singleton pregnancies, who underwent amniocentesis at a median(range) gestational age of 17.56 (14.72-25) for standard genetic indications during aperiod of 16 months, were prospectively recruited. The amniotic fluid was separatedin 3 parts. The biggest part was used for the determination of the karyotype. Thesecond part was tested with PCR for Mycoplasma Hominis and ChlamydiaTrachomatis as well as the culture of aerobic and anaerobic bacteria. The third partwas collected and centrifuged and the supernatant and fluid was stored at -80 Celsius.ELISA was used for the determination of the concentrations of VEGF and PlGF. ResultsRefernce values (median {range}) were 126.56 (45.30-518.92) pg/ml and 18.81(5.61-168.61) pg/ml for amniotic fluid VEGF and PlGF respectively. Amniotic fluidconcentrations of both VEGF and PlGF increased with increasing gestational age atthe time of amniocentesis. Furthermore, amniotic fluid concentrations of PlGFpositively correlated with birth-weight. The effect of maternal age and weight, BMI,race, parity, smoking , delivery mode and fetal gender on amniotic fluidconcentrations of VEGF and PlGF was not significant.IV. ConclusionsThe data of this study provide a useful set of VEGF and PlGF reference values inmidpregnancy amniotic fluid. The study also investigates possible associations amongestablished risk factors for adverse pregnancy outcomes and concentrations of secondtrimester amniotic fluid angiogenic factors in normal pregnancies.The concentrations of both factors increase with increasing gestational age. Overall and according to other studies, both angiogenic factors increase between the first andsecond trimester, consistent with an increased level of angiogenesis as the placentadevelops.Furthermore, our data suggest a positive correlation between amniotic fluid PlGFconcentrations and neonatal birthweight. In some studies, lower levels of PlGF havebeen reported in women who delivered small-for-gestational-age infants, suggestingan antiangiogenic state.Advantages of this study include the prospective collection of amniotic fluid samplesin a clearly defined population, the use of an uncomplicated pregnancy group and theexploration of little-studied characteristics.

ΑγγειογένεσηΓίνεται μία γενική αναφορά στον όρο της αγγειογένεσης και στον ρόλο αυτής σεφυσιολογικές και παθολογικές καταστάσεις. Στη συνέχεια αναλύεται ο μηχανισμόςτης αγγειογένεσης και της νεοαγγειογένεσης και τα στάδια τους.Στο κεφάλαιο της αγγειογένεσης γίνεται εκτεταμένη αναφορά στουςσημαντικότερους αγγειογενετικούς παράγοντες και συγκεκριμένα στους : VEGF,FGF, IGF, TGF, PlGF.Επίσης, αναλύονται τα δύο βασικά είδη αγγειογένεσης δηλαδή η εκβλαστική και ηαγγειογένεση με εγκολεασμό. Στο κεφάλαιο της αγγειογένεσης γίνεται αναφορά στιςπαθολογικές καταστάσεις στις οποίες εμφανίζεται αυτή όπως στον καρκίνο και στοσύνδρομο υπερδιέγερσης των ωοθηκών καθώς και στη θεραπευτική αγγειογένεση.Στη συνέχεια αναλύονται η αγγειογένεση στην εγκυμοσύνη σε όλα τα στάδια από τησύλληψη ως το τέλος της εγκυμοσύνης καθώς και η δράση των αγγειογενετικώναυξητικών παραγόντων που παίζουν ρόλο σ’αυτήν.Παθολογία αγγειογένεσηςΣ’αυτό το δεύτερο κεφάλαιο της παθολογίας της αγγειογένεσης γίνεται εκτεταμένηαναφορά στην παθολογία της κύησης και την αγγειογένεση. Πιο συγκεκριμέναπροσδιορίζονται τα χαρακτηριστικά της αγγειογένεσης σε παθολογία της κύησηςόπως η προεκλαμψία και η ενδομήτρια υπολειπόμενη αύξηση και οι διαφορές της σεσχέση με τη φυσιολογική αγγειογένεση σε φυσιολογικές κυήσεις. Επίσης, μέσα απόμελέτες όπου εξετάστηκαν οι αγγειογενετικοί παράγοντες σε παθολογικές κυήσεις ,γίνεται εκτεταμένη αναφορά στις μεταβολές των συγκεντρώσεών τους στο πλάσματου αίματος ανάλογα με την ηλικία κύησης και την σοβαρότητα της παθολογίας που τη χαρακτηρίζει. Πιο συγκεκριμένα, τονίζεται η αντιαγγειογενετική κατάσταση πουχαρακτηρίζει τις κυήσεις που επιπλέκονται από προεκλαμψία, ενδομήτριαυπολειπόμενη αύξηση ή και εμβρυικό θάνατο.III. Αμνιακό ΥγρόΣτο τρίτο κεφάλαιο γίνεται εκτενής αναφορά στο αμνιακό υγρό και στο ρόλο τουκαθώς και στις διαταραχές του και τη μεταβολή του όγκου του κατά τη διάρκεια μίαςφυσιολογικής ή παθολογικής κύησης.IV. Αγγειογένεση και Αμνιακό ΥγρόΣτο τελευταίο κεφάλαιο του Γενικού Μέρους, γίνεται αναφορά στην παρουσία τωναγγειογενετικών παραγόντων και των υποδοχέων τους στο αμνιακό υγρό.Καταγράφονται μελέτες στις οποίες αποδεικνύεται η παρουσία τους στο αμνιακόυγρό καθώς και οι μεταβολές των συγκεντρώσεων κατά τη διάρκεια μίας φυσιολογικής εγκυμοσύνης αλλά και σε παθολογικές κυήσεις που χαρακτηρίζονταιαπό προεκλαμψία ή ενδομήτρια υπολειπόμενη αύξηση.Το Ειδικό Μέρος περιλαμβάνει:I. Την υπόθεση και τον σκοπό της μελέτηςΗ υπόθεση της μελέτης αφορά την πιθανότητα συσχετισμών των συγκεντρώσεων τουVEGF και του PlGF στο αμνιακό υγρό δευτέρου τριμήνου κύησης, με τα μητρικάχαρακτηριστικά αλλά και με μαιευτικές και νεογνολογικές παραμέτρους. Σύμφωναμε τη μελέτη των Mijal et al, παρατηρήθηκαν μεταβολές στις συγκεντρώσεις τουςστον ορό του αίματος της μητέρας σε σχέση με το δείκτη μάζας σώματος, τον τρόποζωής, το είδος τοκετού και το βάρος του νεογνού. Έχει λοιπόν υποτεθεί πως αυτές οιμεταβολές πιθανόν να διαφαίνονται και στις συγκεντρώσεις των παραγόντων αυτώνστο αμνιακό υγρό του δευτέρου τριμήνου κύησης. Επίσης, η μελέτη αποσκοπεί στον καθορισμό των επιπέδων αναφοράς των αγγειογενετικών παραγόντων στο δεύτεροτρίμηνο κύησης.ΙΙ. Το υλικό και τη μέθοδο της διατριβήςΑναλύεται ο αριθμός των γυναικών που πήραν μέρος στη μελέτη και υποβλήθηκανσε αμνιοπαρακέντηση δευτέρου τριμήνου. Επίσης, καταγράφονται τα κριτήριασύμφωνα με τα οποία επιλέχθηκαν οι προς μελέτη ασθενείς. Το αμνιακό υγρόχωρίστηκε σε 3 τμήματα. Το μεγαλύτερο μέρος χρησιμοποιήθηκε για τονπροσδιορισμό του καρυοτύπου. Το δεύτερο μέρος χρησιμοποιήθηκε για τηδιενέργεια αντίδρασης PCR για Mycoplasma Ηominis και Chlamydia Trachomatisκαθώς και για την καλλιέργεια αερόβιων και αναερόβιων βακτηρίων. Το τρίτο τμήματου αμνιακού υγρού που συλλέχθηκε κατά την αμνιοπαρακέντηση φυγοκεντρήθηκεστους 4 βαθμούς Κελσίου, ενώ το υπερκείμενο υγρό αποθηκεύτηκε σε σωληνάριαπολυπροπυλαινίου στους -80 βαθμούς Κελσίου. Με τη μέθοδο ELISA, καθορίστηκανοι συγκεντρώσεις των VEGF, PlGF. ΑποτελέσματαΤα επίπεδα αναφοράς (μέση τιμή) ήταν 126.56 (45.30-518.92) pg/ml και 18.81(5.61-168.61) pg/ml για τις συγκεντρώσεις των VGEF και PlGF αντίστοιχα. Οισυγκεντρώσεις των δύο παραγόντων αυξάνονταν με την ηλικία κύησης κατά τηστιγμή της αμνιοπαρακέντησης. Ο PlGF παρουσίαζε θετική συσχέτιση με το βάροςγέννησης, ενώ η ηλικία της μητέρας, ο δείκτης μάζας σώματος, η φυλή, ο τόκος, τοείδος τοκετού καθώς και το φύλο του εμβρύου δεν επηρέαζαν τις συγκεντρώσεις τωνVEGF, PlGF στο αμνιακό υγρό του δευτέρου τριμήνου κύησης.IV. ΣυμπεράσματαΗ μελέτη αυτή μας παρέχει χρήσιμες τιμές αναφοράς των VEGF, PlGF στο αμνιακόυγρό του δευτέρου τριμήνου κύησης σε φυσιολογικές κυήσεις. Μέχρι σήμερα, από τηβιβλιογραφία δεν υπάρχουν σαφή στοιχεία για τη συγκέντρωση αυτών τωνπαραγόντων σε φυσιολογικές εγκυμοσύνες στο δεύτερο τρίμηνο κύησης. Φαίνεται πως και οι δύο παράγοντες αυξάνονται με την ηλικία κύησης, γεγονός πουαποδεικνύει αυξημένο επίπεδο αγγειογένεσης με την ανάπτυξη του πλακούντα.Επίσης, φάνηκε θετική συσχέτιση ανάμεσα στη συγκέντρωση του PlGF στο αμνιακόυγρό και του βάρους γέννησης του νεογνού.