Η συμμετοχή των μονοκυττάρων του αίματος στην παραγωγή του παράγοντα sTREM-1 σε ασθενείς με σήψη από πνευμονία του αναπνευστήρα

Abstract

Objectives To investigate the effect of dexamethasone on triggering receptorexpressed on myeloid cells-1(TREM-1).Methods Monocytes from 47 patients with septic shock due to ventilator associatedpneumonia, 34 of whom had received hydrocortisone and 13 had not, were triggeredex vivo with LPS. Lethal infection was induced by Pseudomonas aeruginosa in 96mice, both wild type and TNF-/-; the mice were pretreated either with saline or withdexamethasone/hydrocortisone. TREM-1 on neutrophil membranes was measuredafter sacrifice. Monocytes of the U937 human cell line were challenged by LPS andheat-killed P.aeruginosa with the sequential addition of dexamethasone,hydrocortisone, TNFα and anti-TNF. Expression of TREM-1 and release of solubleTREM-1(sTREM-1) in supernatants were measured.Results The monocytes from patients that received hydrocortisone released smallerconcentrations of sTREM-1 after induction with LPS compared to patients that didnot, on the first day as well as on the third day of the administration. Pretreatmentwith dexamethasone but not hydrocortisone prolonged animal survival and it wasaccompanied by decrease of TREM-1 on neutrophils. LPS and P.aeruginosa inducedthe expression of TREM-1 and the release of sTREM-1 by U937 monocytes; thatwas decreased upon addition of dexamethasone but not of hydrocortisone. Theeffect of dexamethasone was enhanced upon addition of TNFα and lost in thepresence of anti-TNF. The effect was also lost in TNF-/- mice. Gene expression ofTREM-1 by U937 monocytes was decreased after treatment with dexamethasone.Conclusions TREM-1/sTREM-1 is a novel site of action of dexamethasone. Thisaction is related with downregulation of gene expression and is modulated by TNFα.

Σκοπός Σκοπός της παρούσας μελέτης ήταν να μελετήσουμε την επίδραση τηςδεξαμεθαζόνης επί του ενεργοποιητικού υποδοχέα εκφραζόμενου επί τωνμυελοειδών κυττάρων (Triggering receptor expressed on myeloid cells-1, TREM-1)Μεθοδολογία Τα μονοκύτταρα 47 ασθενών με σηπτική καταπληξία λόγωπνευμονίας σχετιζόμενης με το μηχανικό αερισμό, 34 εκ των οποίων είχαν λάβειυδροκορτιζόνη και 13 όχι, διεγέρθηκαν ex vivo με ενδοτοξίνη (LPS). Επιπλέον,χρησιμοποιήθηκαν 96 ποντίκια, αγρίου τύπου και TNF-/-, στα οποία προκλήθηκεθανατηφόρος λοίμωξη με τη χρήση στελέχους P.aeruginosa. Στα ποντίκια είχεπροηγηθεί προθεραπεία είτε με φυσιολογικό ορό, είτε μεδεξαμεθαζόνη/υδροκορτιζόνη. Μετά την θυσία μετρήθηκε ο TREM-1 επί τωνμεμβρανών των ουδετεροφίλων. Παράλληλα, κύτταρα της U937 ανθρώπινηςμονοκυτταρικής σειράς, διεγέρθηκαν με LPS καθώς και με εξουδετερωμένη μεθερμότητα P.aeruginosa, με τη σταδιακή προσθήκη δεξαμεθαζόνης, υδροκορτιζόνης,TNF και anti-TNF. Μετρήθηκε η έκφραση του TREM-1 και η απελευθέρωση τουδιαλυτού υποδοχέα του sTREM-1 στα υπερκείμενα.Αποτελέσματα Τα μονοκύτταρα των ασθενών που είχαν λάβει υδροκορτιζόνηαπελευθέρωσαν χαμηλότερες συγκεντρώσεις sTREM-1 μετά τη διέγερση με LPSσυγκριτικά με των ασθενών οι οποίοι δεν είχαν λάβει, και κατά την πρώτη ημέρα καικατά την τρίτη ημέρα χορήγησης της υδροκορτιζόνης. Η προθεραπεία μεδεξαμεθαζόνη, αλλά όχι με την υδροκορτιζόνη, παρέτεινε την επιβίωση των ζώων καισυνοδεύτηκε από μείωση της έκφρασης του TREM-1 επί των ουδετεροφίλων. Ηδιέγερση με LPS και P.aeruginosa προκάλεσε αυξημένη έκφραση του TREM-1 καιαπελευθέρωση sTREM-1 από τα U937 μονοκύτταρα. Η έκφραση αυτή μειώθηκε μετην προσθήκη δεξαμεθαζόνης, αλλά όχι υδροκορτιζόνης. Η επίδραση αυτή τηςδεξαμεθαζόνης ενισχύθηκε με την προσθήκη του TNFα και εξαφανίστηκε παρουσία του anti-TNF. Επίσης το φαινόμενο αυτό δεν παρατηρήθηκε στα TNF-/- ποντίκια. Ηγονιδιακή έκφραση του TREM-1 στα U937 μονοκύτταρα μειώθηκε έπειτα από τηνπροσθήκη δεξαμεθαζόνης.Συμπεράσματα O TREM-1/sTREM-1 αποτελεί ένα νέο στόχο δράσης για τηδεξαμεθαζόνη. Αυτή η δράση της σχετίζεται με μείωση της γονιδιακής έκφρασης καιεπηρεάζεται από τον TNFα.