Διερεύνηση της ενδοκυττάριας εντόπισης της ογκοκατασταλτικής πρωτεΐνης Maspin, της συσχέτισής της με την έκφραση του αγγειακού ενδοθηλιακού αυξητικού παράγοντα (VEGF) και των σχέσεων αυτών με το HER2 και άλλες κλινικοπαθολογοανατομικές παραμέτρους στο διηθητικό πορογενές καρκίνωμα του μαστού

Abstract

Purpose: Contradictory results have been reported concerning the role of maspin and its cellular distribution in breast cancer. The purpose of our study was to examine the subcellular localization (nuclear – cytoplasmic) of maspin in breast cancer and to compare the evaluation of maspin immunostaining by a pathologist via Light Microscopy (LM) to the estimation via Computerized Image Analysis (CIA) system. We also examined correlations between maspin expression and several clinicopathological parameters. Methods: The sample consisted of 48 primary invasive ductal carcinomas. Maspin immunostaining was quantified and graded via LM by two pathologists, separately in the nuclear and cytoplasmic compartments. Total maspin expression was also estimated via CIA system. Univariate non-parametric statistics and stepwise multivariate ordinal logistic regression were performed. Results: Both maspin components (nuclear and cytoplasmic) were closely associated with each other (p<0.001). Total maspin score was positively and closely associated with nuclear maspin (p<0.001) and cytoplasmic maspin (p<0.001). Total maspin , nuclear maspin and cytoplasmic maspin did not correlate statistically significantly with any of: age, grade, T, N and M status, stage, MVD (CD34), ki-67, p53, estrogen receptor and HER-2 status, nor with any of the four groups of the molecular classification. The only factor that showed a borderline inverse correlation with nuclear maspin (p=0.059) was progesterone receptors positivity. Conclusions: The cytoplasmic and nuclear fractions of maspin seem to be closely interwoven. Evidently, both mutually intertwined counterparts were independendently reflected upon the total maspin levels measured by Image Analysis. Future studies should ideally encompass all three approaches (nuclear; cytoplasmic; total) adopted herein.

Σκοπός της μελέτης. Αντιφατικά αποτελέσματα έχουν ως τώρα αναφερθεί αφορώντα το ρόλο της maspin αλλά και την υποκυτταρική (ενδοκυττάρια) κατανομή της στον καρκίνο του μαστού. Σκοπός της έρευνάς μας ήταν να εξετάσει την υποκυτταρική εντόπιση (πυρηνική – κυτταροπλασματική) της maspin στο διηθητικό πορογενή καρκίνο του μαστού και να συγκρίνει την εκτίμηση της ανοσοϊστοχημικής χρώσης από ένα παθολογοανατόμο μέσω του απλού μικροσκοπίου (Light Microscopy – LM) με την εκτίμηση μέσω ενός Computerized Image Analysis (CIA) συστήματος. Επίσης, εξετάσθηκαν οι συσχετίσεις μεταξύ της έκφρασης της maspin και της έκφρασης του VEGF, της εκτίμησης της μικροαγγειακής πυκνότητας (MVD) μέσω του CD34 και άλλων κλινικοπαθολογοανατομικών παραμέτρων. ΜέθοδοιΤο δείγμα μας αποτέλεσαν 48 πρωτοπαθή πορογενή διηθητικά καρκινώματα του μαστού. Η χρώση της maspin μετρήθηκε και βαθμολογήθηκε από δύο παθολογοανατόμους μέσω του μικροσκοπίου (LM) ξεχωριστά για το πυρηνικό και το κυτταροπλασματικό κυτταρικό διαμέρισμα. Η έκφραση της ολικής maspin εκτιμήθηκε μέσω ενός CIA συστήματος. Εφαρμόσθηκε μονομεταβλητή μη παραμετρική στατιστική καθώς και πολυμεταβλητή stepwise ordinal logistic regression ανάλυση. ΑποτελέσματαΤα δύο υποκυτταρικά κλάσματα της maspin σχετίζονταν θετικά και ισχυρά μεταξύ τους (Ρ < 0.001). Η ολική maspin σχετιζόταν επίσης θετικά και ισχυρά τόσο με το πυρηνικό κλάσμα της όσο και με το κυτταροπλασματικό (Ρ < 0.001 και για τις δύο συσχετίσεις). Η πυρηνική maspin εμφάνιζε αρνητική οριακής στατιστικής σημαντικότητας συσχέτιση με τους προγεστερονικούς υποδοχείς (PR). Ο VEGF σχετιζόταν θετικά και ισχυρά τόσο με τον υποδοχέα HER2 όσο και με το grade του όγκου. Δεν ανεδείχθησαν άλλες συσχετίσεις στατιστικά σημαντικές και των τριών κλασμάτων της maspin (ολικής – πυρηνικής – κυτταροπλασματικής) με τα εξής: ηλικία, grade, status των Τ, Ν και Μ, stage, οιστρογονικοί υποδοχείς (ER), HER2 status, θετικότητα των ki-67 και p53, ούτε και με κάποια από τις τέσσερις ομάδες της μοριακής ταξινόμησης.ΣυμπεράσματαΤο κυτταροπλασματικό και το πυρηνικό κλάσμα της maspin σχετίζονται μεταξύ τους ισχυρά στο διηθητικό πορογενή καρκίνο του μαστού. Και τα δύο στενά συνδεδεμένα υποκυτταρικά κλάσματα της maspin είναι και ισχυρά συσχετισμένα, ανεξάρτητα το ένα από το άλλο, με τα επίπεδα της ολικής maspin, όπως αυτά μετρήθηκαν με το Image Analysis σύστημα. Οι μελλοντικές έρευνες θα είναι χρήσιμο να μελετούν και τις τρεις συνιστώσες της maspin στο κύτταρο (πυρηνική – κυτταροπλασματική – ολική), όπως τις μελετήσαμε και εμείς, για την εξαγωγή ασφαλέστερων συμπερασμάτων. Ο VEGF σχετίζεται θετικά και ισχυρά τόσο με τον υποδοχέα HER2 όσο και με το grade του όγκου και έτσι προκύπτει πως ο HER2 εμφανίζει στενή σύνδεση με τη διαδικασία της αγγειογένεσης.