Μελέτη των μορίων προσκόλλησης (Ν-καντχερίνη, α- και β- κατενίνη) σε νεοπλάσματα των σιαλογόνων αδένων σε σχέση με την ικανότητα διήθησης, μετάστασης και πρόγνωσής τους

Abstract

Objective: To assess the expression of α- and β- catenins and N-cadherin in benign and malignant salivary gland tumors and to investigate their possible role in the development, histological phenotypes and behavior of salivary gland tumors.Material and methods: A total of 49 cases were evaluated immunohistochemically for α- and β- catenins and N-cadherin expression which included 20 benign and 29 malignant salivary gland tumors. Benign salivaty gland tumors included 6 pleomorphic adenomas, 10 papillary cystadenolymphomas, and 4 myoepitheliomas. Among the malignant tumors, 14 adenoid cystic carcinomas, 4 mucoepidermoid carcinomas, 6 polymorphous low-grade adenocarcinomas and 5 adenocarcinomas not otherwise specified were used. The grade and stage of malignant tumors were recorded. Sixteen normal salivary glands were used as control.Immunohistochemistry was performed using primary anti-α and β- catenins rabbit polyclonal antibodies (Sping Bioscience, CA, USA), anti-N-cadherin monoclonal antibody (Dako Cytomation, Noth America Inc) and the Bond Polymer refine Detection (Dako Cytomatio, North America Inc). Each molecule was evaluate for the immunoreactivity, localization and staining intensity. X2-test was used for comparison the results of α- and β-catenins between benign and malignant tumors and between α- and β- catenin in malignant tumors. Also comparison between expression of N-cadherin and perineural invasion in malignant salivary glands was made.Results: Redused immunoreactivity for α- and β- catenins was seen in neoplasms excluding papillary cystadenolymphomas and myoepitheliomas.Membranous and cytoplasmic localization of β-catenin expression was observed in pleomorphic adenomas and adenoid cystic carcinomas and membranous localization in the rest tumors. Furthermore, nuclear localization of β-catenin was seen in 2 cases of adenoid cystic carcinomas and one case of adenocarcinomas not otherwise specified. Membranous localization of N-cadherin expression was observed in one case of papillary cystadenolymphomas and 13 cases (45%) of malignant tumors.Statistical significance was observed for the degree of immunoreactivity of α-catenin between benign and malignant tumors. Also in malignant tumors the degree of immunoreactivity between α- and β-catenin was statistically significant. Relationship was found between N-cadherin expression and perineural invasion in malignant tumors.Conclusions: The reduced immunoreactivity for α- and β- catenins in pleomorphic adenoma suggests that their involvement in the E-cadherin/catenins complex, possibly influences the development and histological types of the tumor.The rare expression of N-cadherin in papillary cystadenolymphoma possibly indicates the mode of its development.The different immunoreactivity of α-catenin between benign and malignant tumors as well as between α- and β- catenin in malignant tumors supports that their involvement in the E-cadherin/catenins complex possibly contributes to development, histological patterns and biological behavior of the salivary gland tumors.Expression of N-cadherin in malignant salivary gland tumors promotes a motile phenotype that is essential for processes like invasion and matastasis.Relationship was found between N-cadherin expression and perineural invasion in malignant tumors but no with the clinical stage.

Σκοπός: Στη παρούσα εργασία μελετήθηκε η έκφραση της α- και β- κατενίνης και Ν-καντχερίνης στα νεοπλάσματα των σιαλογόνων αδένων ώστε να εκτιμηθεί η συμβολή τους στη ανάπτυξη, διαμόρφωση της αρχιτεκτονικής δομής τους και στην βιολογική συμπεριφορά τους.Υλικό και μέθοδος: Το υλικό της μελέτης αποτέλεσαν 6 πολύμορφα αδενώματα, 10 θηλώδη κυσταδενολεμφώματα, 4 μυοεπιθηλιώματα, 14 αδενοκυστικά καρκινώματα, 4 βλεννοεπιδερμοειδή καρκινώματα, 6 πολύμορφα αδενοκαρκινώματα χαμηλής κακοήθειας και 5 μη ειδικά αδενοκαρκινώματα. Ως μάρτυρες χρησιμοποιήθηκαν 16 φυσιολογικοί σιαλογόνοι αδένες. Σε όλες τις περιπτώσεις των κακοήθων νεοπλασμάτων καταγράφηκε ο ιστολογικός βαθμός κακοήθειας (grade) και το κλινικό στάδιο (stage). Για την ανοσοϊστοχημική εκτίμηση των μορίων προσκόλλησης, χρησιμοποιήθηκε πολυκλωνικό αντίσωμα έναντί της α- και β-κατενίνης (Sping Biosience, CA, USA), μoνοκλωνικό αντίσωμα έναντι της Ν-καντχερίνης (Dako Cytomation,North America Inc) και το σύστημα ανίχνευσης Bond Polymer refine Detection (DakoCytomation North America Inc). Σε κάθε περίπτωση εκτιμήθηκε ο βαθμός έκφρασης, η εντόπιση και η ένταση της ανοσοχρώσης. Τα ευρήματα αξιολογήθηκαν στατιστικά με τη χρήση του X2-test.Αποτελέσματα: Μειωμένος βαθμός έκφρασης για την α- και β- κατενίνη διαπιστώθηκε σε όλα τα νεοπλάσματα, εκτός από το θηλώδες κυσταδενολέμφωμα και το μυοεπιθηλίωμα.Η α-κατενίνη εντοπίζονταν μεμβρανικά και κυτταροπλασματικά σε όλα τα νεοπλάσματα εκτός από το θηλώδες κυσταδενολέμφωμα και το μυοεπιθηλίωμα. Η β-κατενίνη εντοπίζονταν μεμβρανικά και κυτταροπλασματικά στο πολύμορφο αδένωμα και αδενοκυστικό καρκίνωμα, ενώ στα υπόλοιπα νεοπλάσματα μεμβρανικά. Επιπλέον σε 2 περιπτώσεις αδενοκυστικού καρκινώματος και μία μη ειδικού αδενοκαρκινώματος, η β-κατενίνη εντοπίζονταν και στον πυρήνα των νεοπλασματικών κυττάρων, Από τα καλοήθη νεοπλάσματα, η Ν-καντχερίνη εκφράζονταν μεμβρανικά σε μία περίπτωση θηλώδους κυσταδενολεμφώματος (1/10), ενώ στον συνολικό αριθμό των κακοήθων νεοπλασμάτων σε ποσοστό 45% (13/29). Διαπιστώθηκε διαφορά στο βαθμό έκφρασης και εντόπισης της α-κατενίνης μεταξύ των καλοήθων και κακοήθων νεοπλασμάτων και μεταξύ της α- και β- κατενίνης στα κακοήθη νεοπλάσματα.Η έκφραση της Ν-καντχερίνης στα κακοήθη νεοπλάσματα είχε σχέση με την περινευρική διήθηση αλλά όχι με το κλινικό τους σταδιο.Συμπεράσματα: Ο μειωμένος βαθμός έκφρασης της α- και β- κατενίνης στο πολύμορφο αδένωμα υποστηρίζει ότι η εμπλοκή των μορίων στο σύμπλοκο Ε-καντχερίνης/κατενινών έμμεσα συμβάλλει στην ανάπτυξη και διαμόρφωση της ιστολογικής του εικόνας.Η σπάνια έκφραση της Ν-καντχερίνης στο θηλώδες κυσταδενολέμφωμα πιθανόν υποστηρίζει τον τρόπο ανάπτυξης του.Η διαφορετική έκφραση και εντόπιση της α-κατενίνης μεταξύ των καλοήθων και κακοήθων νεοπλασμάτων, αλλά και μεταξύ της α- και β-κατενίνης υποστηρίζει ότι η με διαφορετικό βαθμό και τρόπο εμπλοκή τους στο σύμπλοκο Ε-καντχερίνης/κατενινών συμβάλλει στην ανάπτυξη, στη διαμόρφωση της ιστομορφολογικής εικόνας τους και επηρεάζει την βιολογική συμπεριφορά τους.Η έκφραση της Ν-καντχερίνης στα κακοήθη νεοπλάσματα είναι ενδεικτική της ικανότητας των κυττάρων να μετακινούνται και να διηθούν με αποτέλεσμα την εμφάνιση μεταστάσεων. Ειδικά η περινευρική διήθηση από τα νεοπλασματικά κύτταρα φαίνεται οτι έχει σχέση με την έκφραση Ν-καντχερίνης.