Σχεδιασμός και σύνθεση πεπτιδικών και μη πεπτιδικών αναλόγων επιτόπων της μυελίνης για πιθανή ανοσοθεραπεία της σκλήρυνσης κατά πλάκας

Abstract

The aim of this thesis was to immunologically control the attack of myelin sheath in MS patients without the total suppression of the immune system. The thesis was focused on the synthesis of the following molecules: (a) Linear peptide analogues based on myelin epitopes (Table 1). (b) Linear and cyclic peptide analogues conjugated with mannan via the decapeptide (Lys-Gly)5 as a bridge (Table 2, 4). (c) A polypeptide, based on copolymer-1, conjugated with mannan via the decapeptide (Lys-Gly)5 as a bridge (Table 2, 4). (d) Peptide dendrimers (MAPs) conjugated with mannan via the tetrapeptide (Lys-Gly)2 as a bridge (Table 3, 4). (e) Anthraquinone type analogues (Fig. 1) in combination with peptide analogues (Fig. 2). The synthesis of peptide analogues was achieved either conventionally or with microwave irradiation. The resins utilized were CLTR-Cl, Wang and NovaSynTGA, which are combined with Fmoc/tBu methodology. The conjugation of peptides with mannan was performed in solution, while the reaction was monitored with RP-HPLC.

Κατά την εκπόνηση της παρούσας διατριβής έγινε προσπάθεια, με βάση την κατανόηση της παθοφυσιολογίας της ΣΚΠ, να ελεγχθεί η ανοσολογική επίθεση στη μυελίνη, χωρίς να κατασταλεί ευρύτερα το ανοσοποιητικό σύστημα. Συγκεκριμένα, έγιναν: (α) Σύνθεση γραμμικών πεπτιδικών αναλόγων, τα οποία είναι υπεύθυνα για εμφάνιση ΣΚΠ (Πίνακας 1). (β) Σύνθεση πεπτιδικών αναλόγων, γραμμικών και κυκλικών, που φέρουν το δεκαπεπτίδιο (Lys-Gly)5 ως γέφυρα σύνδεσης με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη (Πίνακας 2). (γ) Σύνθεση πολυπεπτιδίου με βάση το copolymer-1 και το δεκαπεπτίδιο (Lys-Gly)5 ως γέφυρα σύνδεσης με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη (Πίνακας 2). (δ) Σύνθεση πεπτιδικών δενδριμερών (MAPs) που φέρουν το τετραπεπτίδιο (Lys-Gly)2 ως γέφυρα σύνδεσης με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη (Πίνακας 3). (ε) Σύνθεση αναλόγων ανθρακινονών (Σχ. 1) και σύζευξή τους με πεπτιδικά ανάλογα (Σχ. 2). Η σύνθεση των πεπτιδικών αναλόγων έγινε είτε με το συμβατικό τρόπο είτε με τη χρήση μικροκυμάτων. Οι ρητίνες που χρησιμοποιήθηκαν ήταν οι CLTR-Cl, Wang και NovaSynTGA, οι οποίες συνδυάζονται με την Fmoc/tBu μεθοδολογία. Μερικά από τα πεπτιδικά ανάλογα που συντέθηκαν συζεύχθηκαν με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη στην οξειδωμένη και ανηγμένη μορφή του (Πίνακας 4). Η σύζευξη με τη μαννάνη έγινε σε υγρή φάση και ο έλεγχος της σύζευξης έγινε με RP-HPLC χρωματογραφία.