Ανοσοϊστοχημική μελέτη της πρωτεΐνης p53 και NM23 σε ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα σχετιζόμενο με λοίμωξη από ιό ηπατίτιδας Β

Abstract

The aim of this study was to evaluate the immunohistochemichal expression of/?53and non-metastatic NM-23 gene in series of 122 hepatocellular carcinomas (HCCs)related to Hepatitis Β Virus (HBV). The adjacent hepatic tissue was also evaluated.Correlation with the survival was described.The total of 122 HCCs was classified into high grade (22.9%), middle (55.7%) andlow grade (21.3%). Adjacent non-neoplastic liver tissue was observed in 102 cases.The immunohistochemichal avidin-biotin-peroxidase complex (ABC) method wasperformed on formalin fixed paraffin sections for the detection of p53 and NM-23proteins using monoclonal antibodies.The x2 test was applied to identify the correlation between p5 3 and NM-23 with thegrade and the expression to the adjacent tissue. Survival estimates were calculated byusing the Kaplan-Meier method.The expression ofp53 was observed in 48/122 (39.3%) cases of HCCs. There wasno statistically significant correlation with the histological grade (p=0.7) and survival(p=0.46). A statistically significant correlation of the p53 protein expression wasdetected in the adjacent cirrhotic parenchyma (p<0.001).The NM-23 protein was detected in 88/122 (72.1%) cases of HCCs. There was astatistically significant correlation between the expression of NM-23 protein and thehistological grade (p=0.012). The expression of NM-23 protein was correlated withlo nger survival (p<0.001).Our conclusions suggest that the immunohistochemichal detection ofp53 protein inHCC cases related to HBV does not correlate with the grade and the prognosis. Theexpression of/?53 protein to the cirrhotic tissue confirms the role of this gene to theearly stages of carcinogenesis. The expression of NM-23 protein was correlated withthe grade and prolonged survival. There was no statistical significance regarding thedetection of this protein to the adjacent tissue. This is because the activity of NM-23gene is a late event in carcinogenesis.

Ο σκοπός αυτής της εργασίας ήταν η ανοσοϊστοχημική μελέτη της έκφρασης τηςπρωτεΐνης του ρ53 και του ΝΜ-23 (non-metastatic 23) γονιδίου σε 122 περιπτώσειςηπατοκυτταρικού καρκίνου (ΗΚΚ) σχετιζόμενου με λοίμωξη από HBV. Επίσης σε102 περιπτώσεις, εξετάστηκε και ο πέριξ ηπατικός ιστός σε σχέση με την έκφρασητης πρωτεΐνης των παραπάνω γονιδίων.Από τις 122 περιπτώσεις, οι 28 (22.9%) αφορούσαν καρκίνωμα υψηλήςδιαφοροποίησης (grade 1), οι 68 (55.7%) μέσης (grade 2) και οι 26 (21.3%) χαμηλήςδιαφοροποίησης (grade 3).Το υλικό που εξετάστηκε προερχόταν από τομέςπαραφίνης οι οποίες προηγουμένως είχαν μονιμοποιηθεί με φορμαλδεΰδη. Για τηνανοσοϊστοχημική μελέτη χρησιμοποιήθηκε η μέθοδος του συμπλέγματος αβιδίνηςβιοτίνης-υπεροξειδάσης (avidin-biotin-peroxidase complex ABC) καθώς καιμονοκλωνικά αντισώματα για τον εντοπισμό της πρωτεΐνης ρ53 και ΝΜ-23.Η δοκιμασία χ2 χρησιμοποιήθηκε για την αξιολόγηση των εν λόγωανοσοϊστοχημικών ευρημάτων σε σχέση με το βαθμό κακοήθειας. Χρησιμοποιήθηκεη στατιστική μέθοδος Kaplan-Meier για την αξιολόγηση των ανοσοϊστοχημικώνευρημάτων των πρωτεϊνών ρ53 και ΝΜ-23 σε σχέση με την επιβίωση των ασθενώνμε ΗΚΚ.Η έκφραση της πρωτείνης του ρ53 ανιχνεύθηκε σε 48/122 (39.3%) περιπτώσειςΗΚΚ. Δε βρέθηκε στατιστικά σημαντική συσχέτιση της έκφρασης της και τουβαθμού κακοήθειας (ρ=0.7) καθώς και της επιβίωσης των ασθενών (ρ=0.46).Παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική σχέση της έκφρασης της πρωτεΐνης ρ53 στονκιρρωτικό ιστό (ρ<0.001) σε σχέση με τον πέριξ μη κιρρωτικό ιστό.Η έκφραση της πρωτεΐνης ΝΜ-23 ανιχνεύθηκε σε 88/122 (72.1%) περιπτώσεωνΗΚΚ. Παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική σχέση μεταξύ της έκφρασης τηςπρωτεΐνης ΝΜ-23 και του βαθμού κακοήθειας (ρ=0.012). Δε βρέθηκε στατιστικάσημαντική συσχέτιση της έκφρασης της πρωτεΐνης στον παρακείμενο κιρρωτικό καιμη κιρρωτικό ηπατικό ιστό (ρ>0.2). Η έκφραση της πρωτεΐνης ΝΜ-23 συσχετίσθηκεμε καλύτερη πρόγνωση των ασθενών με ΗΚΚ (ρ<0.001).Από τη μελέτη αυτή προκύπτει ότι η πρωτεΐνη ρ53 δε συσχετίζεται με το βαθμόκακοήθειας του ΗΚΚ και την επιβίωση των ασθενών αυτών που συγχρόνωςπαρουσιάζουν λοίμωξη από HBV. Η ανίχνευση της πρωτεΐνης αυτής στονπαρακείμενο κιρρωτικό ιστό ενισχύει την άποψη ότι το ρ53 εμπλέκεται στα αρχικάστάδια της καρκινογένεσης. Η έκφραση της πρωτεΐνης ΝΜ-23 συσχετίσθηκε με τοβαθμό κακοήθειας του ΗΚΚ και με παρατεταμένη επιβίωση των ασθενών αυτών ενώδεν ανιχνεύθηκε στον παρακείμενο κιρρωτικό ή μη κιρρωτικό ιστό, γεγονός πουυποδηλώνει έμμεσα την εμπλοκή του ΝΜ-23 σε όψιμα στάδια της καρκινογένεσης.