Ο ρόλος των πολυμορφισμών C242T, A640G, -930A/G στο γονίδιο της υπομονάδας P22PHOX της NADPH οξειδάσης στην εκδήλωση πρώιμου εμφράγματος του μυοκαρδίου

Abstract

Introduction. The importance of reactive oxygen species (ROS) in vascular physiology and pathology is becoming increasingly evident since it controls the entire cell redox state. Enzymatic production of free radicals plays a key role in atherogenesis. All cell types in vascular wall produce ROS mainly derived from enzymatic activity of phagocytic type NAD(P)H oxydases . p22PHOX, a small protein component of NAD(P)H oxidase in phagocytes and all vascular wall cells, is essential for the enzyme activity and consequently for ROS within vascular wall. C242T polymorphism of p22PHOX gene (CYBA) leads to a substitution of His to Tyr located in the potential heme binding site and evidence suggest that may affect enzymatic activity by changing the redox state. CYBA A640G polymorphism located in 3’-UTR, has no frank aminoacid substitution but its genetic variant might modify mRNA processing and stability ,thus influencing p22PHOX biosynthesis. -930A/G polymorphism is located in the promoter region of CYBA and it has been speculated to have a functional effect on the modulation of CYBA transcriptional activity. However, theirs role in the development of premature myocardial infarction (MI) as well as its ability to modify overall oxidative stress status and endothelial injury is unknown. Aim:We examined the effect of C242T , A640G , -930A/G polymorphisms on p22PHOX gene on the risk for MI, and on the variations of ox-LDL and sP-selectin. Methods. This study enrolled a total number of 429 subjects: 202 patients of both sexes with a first event of premature myocardial infarction (MI), and 227 age- and gender- matched controls Polymorphisms were detected by RLFPs, and their distribution were consistent with the Hardy-Weinberg equilibrium. Circulating levels of ox-LDL and P-selectin were determined by ELISA. All reported p-values are based on two-sided tests and compared to a significance level of 5%.SPSS version 12.0 (SPSS Inc, U.S.A.) software was used for all the statistical calculations.

Εισαγωγή. Η σημασία των δραστικών μορίων οξυγόνου (ROS) στη παθοφυσιολογία των καρδιαγγειακών νοσημάτων είναι πλέον δεδομένη, καθώς έχει αποδεχτεί το γεγονός ότι ελέγχει την οξειδοαναγωγική κατάσταση του κυττάρου,.Η ενζυμική παραγωγή των ελευθέρων ριζών διαδραματίζει σπουδαίο ρόλο στην αθηρογένεση. Όλα τα είδη κυττάρων του αγγειακού τοιχώματος παράγουν ROS, κυρίως μέσω της δράσης της φαγοκυτταρικού-τύπου NAD(P)H οξειδάσης. Η p22PHOX, μια μικρή πρωτεϊνική υπομονάδα της NAD(P)H οξειδάσης των φαγοκυττάρων και των κυττάρων του αγγειακού τοιχώματος, είναι σημαντική για την δραστηριότητα του ενζύμου και κατ’επέκταση για την παραγωγή των ROS στο αγγειακό τοίχωμα. Ο πολυμορφισμός C242T του γονιδίου p22PHOX (CYBA) οδηγεί σε αντικατάσταση της ιστιδίνης (His) από τυροσίνη (Tyr) που εδράζεται στη θέση σύνδεσης της αίμης και υπάρχουν ενδείξεις πως επηρεάζει τη δραστηριότητα του ενζύμου επηρεάζοντας την οξειδοαναγωγική κατάσταση. Ο πολυμορφισμός A640G του CYBA που εδράζεται στο 3’-UTR, δεν οδηγεί σε αντικατάσταση αμινοξέος, αλλά αυτή η γενετική ισομορφή, ενδεχομένως τροποποιεί το ρυθμό της μεταγραφής και τη σταθερότητα της αλυσίδας του mRNA, επηρεάζοντας έτσι τη βιοσύνθεση της p22PHOX . Ο πολυμορφισμός -930A/G εδράζεται στην περιοχή του εκκινητή (promoter region) του CYBA και εικάζεται πως έχει λειτουργικό ρόλο στη ρύθμιση της έκφρασης του CYBA. Παρόλα αυτά, ο ρόλος τους στην ανάπτυξη πρωίμου εμφράγματος του μυοκαρδίου (MI), καθώς και η επίδρασή τους στο οξειδωτικό stress και στην ενδοθηλιακή δυσλειτουργία παραμένει ασαφής. Στόχος: Εξετάσαμε την επίδραση των πολυμορφισμών C242T , A640G , -930A/G του γονιδίου p22PHOX στον κίνδυνο εμφάνισης εμφράγματος του μυοκαρδίου, και στα επίπεδα της ox-LDL και της sP-σελεκτίνης. Mέθοδοι. Στη μελέτη συμπεριελήθησαν συνολικά 429 άτομα : 202 ασθενείς και των δύο φύλων με πρώτη εμφάνιση πρωίμου εμφράγματος του μυοκαρδίου (MI) και 227 υγιή άτομα -μετά από προσαρμογή για την ηλικία και το φύλο. Οι πολυμορφισμοί ανιχνεύθηκαν με RLFPs, και η κατανομή τους ήταν συμβατή με τη θεωρία των Hardy-Weinberg. Τα κυκλοφορούντα επίπεδα της ox-LDL και της P-σελεκτίνης προσδιορίστηκαν με τη μέθοδο ELISA. Όλες οι αναφερόμενες τιμές στατιστικής σημαντικότητας - p βασίζονται σε two-sided tests και ως διάστημα εμπιστοσύνης καθορίστηκε το 95%. Ως πρόγραμμα στατιστικής επεξεργασίας χρησιμοποιήσαμε το SPSS version 12.0 (SPSS Inc, U.S.A).