Διαγνωστική προσέγγιση και γονιδιακή ανάλυση της α+-θαλασσαιμίας στον πληθυσμό της Κρήτης

Abstract

Fifty eight non iron-deficient individuals with mild erythrocytic morphological abnormalities, normal or slightly decreased MCV and MCH values, normal chromatographic findings and HbH inclusions by methyl violet staining in the post, but not in the pre-incubation preparation, were screened with DNA analysis for the six most common α-globin gene molecular defects in the Greek population, i.e. the-α³·⁷ deletion, Poly(A)Tsaudi, IVS1 5΄ pentanucleotide deletion, Poly(A)AATAAA>AATGAA, Hb Agrinio και Hb Icaria. Fifty of 58 individuals (86.2%) were found carriers of a α-globin gene molecular defect. The detected defects were: the -α³·⁷ deletion (58%), the IVS1 5΄ pentanucleotide deletion (34%), the Hb Icaria mutation (4%) and the Poly(A) Tsaudi signal mutation (2%). In addition there was one -α³·⁷ deletion in homozygous state with α⁺-phenotype. In conclusion, the described method can be used as a helpful screening tool for the diagnostic approach of α⁺-thalassemia carriers in routine laboratories, in order to select those who need further investigation based on the personal and family history, the hematological phenotype and mainly the necessity for genetic counseling or prenatal diagnosis. Moreover, if used for estimation of the incidence of α-thalassemia carriers, it may prove more sensitive in the detection of these carriers than previously reported.

Μελετήσαμε με DNA ανάλυση 58 πιθανούς α⁺-θαλασσαιμικούς φορείς οι οποίοι επελέγησαν με κριτήρια α) την παρουσία ήπιων μορφολογικών ερυθροκυτταρικών αλλοιώσεων, β) τις φυσιολογικές ή ελαφρά μειωμένες τιμές ερυθροκυτταρικών δεικτών MCV και MCH, γ) τα φυσιολογικά χρωματογραφικά ευρήματα, δ) την απουσία σιδηροπενίας και ε) την παρουσία ενδοερυθροκυτταρικών εγκλείστων HbH με methyl violet χρώση στο μετά αλλά όχι στο πριν την επώαση δείγμα. Ο έλεγχος έγινε για τις 6 πιο συχνές α⁺-θαλασσαιμικές διαταραχές στον Ελληνικό πληθυσμό, -α³·⁷έλλειψη, Poly(A)Tsaudi, IVS1 5΄ πεντανουκλεοτιδική έλλειψη, Poly(A)AATAAA>AATGAA, Hb Agrinio και Hb Icaria. Βρήκαμε ότι 50 από τους 58 εξετασθέντες (86,2%) έφεραν α-θαλασσαιμική διαταραχή. Η -α³·⁷ έλλειψη ανιχνεύθηκε σε 29 εξετασθέντες (58%), η IVS1 5΄ πεντανουκλεοτιδική έλλειψη ανιχνεύθηκε σε 17 εξετασθέντες (34%), η Hb Icaria ανιχνεύθηκε σε δύο εξετασθέντες (4%), και η μεταλλαγή σήματος Poly(A)Tsaudi ανιχνεύθηκε σε ένα εξετασθέντα (2%). Σε αυτά τα άτομα πρέπει να προστεθεί άλλο ένα άτομο ομόζυγο για την -α³·⁷ έλλειψη με α⁺-θαλασσαιμικό φαινότυπο. Συμπεραίνουμε ότι η περιγραφείσα μεθοδολογία, μπορεί να χρησιμοποιηθεί με ασφάλεια για τη διαγνωστική προσέγγιση των α⁺-θαλασσαιμικών φορέων σε Εργαστήρια ρουτίνας προκειμένου να επιλεγούν αυτοί που χρήζουν περαιτέρω ελέγχου με βάση το ατομικό και οικογενειακό ιστορικό, τον αιματολογικό φαινότυπο και κυρίως την αναγκαιότητα για γενετική συμβουλή ή προγεννητική διάγνωση. Επιπλέον εάν η μέθοδος αυτή χρησιμοποιηθεί για τον υπολογισμό της συχνότητας των α-θαλασσαιμικών φορέων, πιθανόν να αποδειχθεί πλέον ευαίσθητη στον εντοπισμό τους σε σχέση με προηγούμενα περιγραφείσες μεθόδους.