Αντισώματα κατά Ro(SSA) και La(SSB) κυτταρικών αντιγόνων: Ανάπτυξη μεθόδου ανοσοαποτύπωσης (Western blot)

Abstract

An immunoblotting method for the detection of antiRo and antiLa antibodies was developed, using two antigenic sources, thymus extract and human red blood cells. The reactivity of sera from patients with primary Sjogren’s syndrome towards the Ro and La polypeptides was examined and compared with the detection of precipitins by counterimmunoelectrophoresis (CIE). Sera with antiRo reactivity recognized two polypeptides with MW 50KD and 60KD and sera with antiLa reactivity one polypeptide with 40KD. Immunoblotting was more sensitive in the detection of antiRo (89%) and antiLa (90%) antibodies than CIE (76% and 73% respectively). AntiLa antibodies were frequently detected in sera of patients with antiRo precipitins antiLa antibodies were detected in sera of patients with antibodies to the 50KD Ro polypeptide rather than in sera of patients with antibodies to the 60KD Ro polypeptide indicating that La and 50KD Ro polypeptides are interrelated. Patients with antibodies to the 50KD Ro and La antigen exhibited a severe form of the disease.

Χρησιμοποιώντας δύο διαφορετικές αντιγονικές πηγές, θύμο αδένα μοσχαριού και ανθρώπινα ερυθρά αιμοσφαίρια, αναπτύχθηκε με την τεχνική της ανοσοαποτύπωσης μέθοδο για την ανίχνευση αντιRo και αντιLa αντισωμάτων. Οροί ασθενών με πρωτοπαθές σύνδρομο Sjogren (1° σΣ) μελετήθηκαν με την μέθοδο αυτή και τα αποτελέσματα της ανοσοαποτύπωσης συγκρίθηκαν με αυτά της αντίθετης ανοσοηλεκτροφόρησης (ΑΑΗ). Οροί ασθενών με αντιRo ειδικότητα αναγνώριζαν δύο πολυπεπτίδια με ΜΒ 50KD και 60KD (ερυθρά αιμοσφαίρια) και οροί με αντιLa ειδικότητα ένα πολυπεπτίδιο με ΜΒ 40KD. Η τεχνική της ανοσοαποτύπωσης παρουσίασε μεγαλύτερη ευαισθησία ανίχνευσης αντιRo (89%) και αντιLa (90%) αντισωμάτων από την ΑΑΗ (76% και 73% αντίστοιχα). Η ανίχνευση αντιLa αντισωμάτων (μέθοδος ανοσοαποτύπωσης) ήταν συχνότερες σε ασθενείς με αντιRo ιζηματίνες. ΑντιLa αντισώματα ανιχνεύθηκαν συχνότερα σε ορούς με αντισώματα κατά του Ro πολυπεπτιδίου 50KD από ότι σε ορούς με αντισώματα κατά του 60KD υποδεικνύοντας ότι η σύνδεση ανάμεσα στα αντιγόνα Ro και La αφορά μόνο το μικρότερο πολυπεπτίδιο του αντιγόνου Ro. Τέλος, φάνηκε ότι η παρουσία αντισωμάτων κατά των πολυπεπτιδίων Ro 50KD και La συσχετίζεται με εκδηλώσεις βαρειάς μορφής της νόσου.