Η κλινική σημασία της ανοσοϊστοχημικής και μοριακής διερεύνησης βιοδεικτών στη διαφορική διάγνωση θυλακιωδών αλλοιώσεων του θυρεοειδούς αδένα

Abstract

Οbjective: The role of liquid based cytology, as an exclusive cytopreparatory methodin thyroid fine needle aspiration samples, was investigated. To investigate thepotential of Classification and Regression Trees (CARTs) for the diagnosis of thyroidlesions based on cell block immunocytochemistry and cytological outcome.Study design: A total of 956 histologically confirmed cases (673 benign and 283malignant) from patients with thyroid nodules were prepared via liquid-basedcytology and evaluated. The diagnostic features were evaluated by two experiencedcytopathologists and τhe reports were issued according to the Bethesdaclassification for reporting thyroid cytopathology (TBSRTC). Patients were subdividedinto three categories depending on the histological diagnosis. The coorelationbetween cytologic and histologic diagnosis was done and the possibility ofperforming ancillary techniques, was also estimated. The residual material, was usedin preparing more slides, in order to evaluate the expression of 3 monoclonalantibodies (CK-19, GAL-3, HMBE-1). Moreover, 160 cases were submitted inmolecular investigation for detecting the BRAF V600E proto-oncogene.Results: The overall diagnostic accuracy was 90.54%, with 96.27% and 88.26%sensitivity and specificity, respectively. The induction of immunocytochemistry andthe CART model increased the overall diagnostic accuracy to 99.04% and thesensitivity and specificity to 98.88% and 99.11%, respectively. Ιmmunoreactivity wasobserved >80% in cases of papillary carcinoma for CK-19, HBME-1, and Galectin-3.The BRAF mutation was detected in 54,83% and 77.33% of patients with borderlineand malignant cytological diagnosis respectively, concerning papillary carcinoma.Conclusions: According to our study, LBC method by the presence of stable cellmorphology in smears and the possibility of performing ancillary techniques in thesamples, enhances the diagnostic role of thyroid FNA, contributing decisively in theappropriate management of nodular thyroid lesions.

Σκοπός: Στην παρούσα μελέτη διερευνήθηκαν οι δυνατότητες της μεθόδουκυτταρολογίας υγρής φάσης σε υλικό παρακέντησης με λεπτή βελόνη (FNA) όζωντου θυρεοειδούς αδένα. Δοκιμάστηκε δέντρο ταξινόμησης (Classification AndRegression Tree – CART) τύπου CHAID και διερευνήθηκε η δυνατότητααυτοματοποίησης της διαγνωστικής διαδικασίας και η παραγωγή ενός αλγορίθμουεύκολα κατανοητού για εφαρμογή στην καθημέρα πράξη.Υλικό και μέθοδοι: Μελετήθηκαν 956 ασθενείς (673 με καλοήθεια και 283 μεκακοήθεια), που επιλέχθηκαν με κριτήριο την ύπαρξη ιστολογικής επιβεβαίωσηςαπό ένα σύνολο ασθενών που υποβλήθηκαν σε FNA υπό υπερηχογραφικήκαθοδήγηση από το 2012 μέχρι το 2016. Τα επιχρίσματα παρασκευάστηκανσύμφωνα με την τεχνική ThinPrep® και αξιολογήθηκαν από δύο τουλάχιστονέμπειρους παρατηρητές, εφαρμόζοντας τη διαγνωστική ταξινόμηση τουσυστήματος κατά Bethesda (TBSRTC). Οι ασθενείς υποδιαιρέθηκαν σε τρεiςκατηγορίες ανάλογα με την ιστολογική διάγνωση. Έγινε συσχέτιση κυτταρολογικής-ιστολογικής διάγνωσης και υπολογίστηκε η δυνατότητα εφαρμογής επικουρικώνμεθόδων στο υλικό που παρέμενε στο φιαλίδιο, εκτιμώντας ανοσοκυτταροχημικάτην έκφραση τριών μονοκλωνικών αντισωμάτων (CK-19, GAL-3, HMBE-1) και σεεπιλεγμένες περιπτώσεις διερευνώντας μοριακά το ογκογονίδιο BRAF. Με βάση ταστοιχεία της ανοσοκυτταρολογίας και της κυτταρολογικής διάγνωσηςκατασκευάστηκε αλγόριθμος τύπου CART και τα δεδομένα εκτιμήθηκαν.Αποτελέσματα: Η διαγνωστική ακρίβεια της μεθόδου ήταν 90,54%, με ευαισθησίακαι ειδικότητα 96,27% και 88,26%., αντίστοιχα. Η χρήση της ανοσοκυτταροχημείαςκαι των δέντρων ταξινόμησης (μοντέλο CART) οδήγησαν σε αύξηση τηςδιαγνωστικής ακρίβειας της μεθόδου σε 99,04%, με ευαισθησία και ειδικότητα98,88% και 99,11%, αντιστοίχως. Παρατηρήθηκε ανοσοθετικότητα >80% για τοθηλώδες καρκίνωμα σε CΚ-19, HBME-1, και Galectin-3. Σε 160 επιλεγμένεςπεριπτώσεις, ανιχνεύτηκε η μεταλλαγή του ογκογονιδίου BRAF V600E, κατά 54,83%και 77,33% σε ασθενείς με αμφίβολη και κακοήθη κυτταρολογική διάγνωση,αντίστοιχα, αφορώντας το θηλώδες καρκίνωμα.Συμπεράσματα: Η παρουσία σταθερών κυτταρικών χαρακτηριστικών σταεπιχρίσματα υγρής φάσης και η δυνατότητα εφαρμογής επικουρικών τεχνικών στοδείγμα, ενισχύει το διαγνωστικό ρόλο της FNA θυρεοειδούς, συμβάλλονταςαποφασιστικά στην αντιμετώπιση ασθενών με οζώδεις παθήσεις του θυρεοειδούςαδένα.