Ιστοπαθολογική μελέτη της ενδοϋαλοειδικής χορήγησης του Avastin (bevacizumab) σε κονίκλους

Abstract

Thirty male rabbits of New Zealand weighing 2.8 kg were used for this study. The rabbits were divided into five groups. Group 1 (n=6) right eye of each rabbit received an intravitreal injection of 1.25 mg of bevacizumab and were killed at the end of the month. Group 2 (n=6) right eye of each rabbit received two intravitreal injections of 1.25 mg of bevacizumab with an interval of one month and were killed at the end of the second month. Group 3 (n=6) right eye of each rabbit received an intravitreal injection of 2.5 mg of bevacizumab and were killed at the end of the month. Group 4 (n=6) right eye of each rabbit received two intravitreal injections of 2.5 mg of bevacizumab with an interval of one month and were killed at the end of the second month. Group 5 (n=6) right eye of each rabbit received an intravitreal injection of 0.05 ml of normal saline and were killed at the end of the second month. Left eyes of all groups received no injection. Every day monitoring revealed no signs of adverse effects such as cataract, corneal opacities or retinal detachment. There were no signs of inflammation or infection in any of the eyes such as purulent secretion or ciliary injection. The histological evaluation of all the eyes that received single or repeated doses of 1.25 mg or 2.5 mg of intravitreal bevacizumab (Avastin) revealed no important histological changes in all the anatomical parts that were examined. There were no signs of necrosis or degeneration of the retina. Retinal thickness was unchangeable in all specimens. None of the left eyes had any histological change. Some specimens of right eyes revealed chronic inflammatory infiltrations consisting of lymphocytes, plasma cells and rarely eosinophils. One rabbit of group 2, one of group 3 and one of group 4 presented with chronic inflammatory infiltrations in the nerve fiber layer of the retina. Two rabbits of group 1 and one of group 2 revealed chronic inflammatory infiltrations, especially around the optic disc and in iris. Left eyes of these rabbits had no histological changes. The rest of the rabbits of groups 1-4 as well as the rabbits of group 5 revealed histological normal specimens.

Χρησιμοποιήθηκαν τριάντα αρσενικοί κόνικλοι Νέας Ζηλανδίας που ζύγιζαν από 2,8 kg μέχρι 3,5 kg. Οι κόνικλοι αυτοί χωρίστηκαν σε πέντε ομάδες των έξι ζώων η κάθε μια Ομάδα 1 ( 6 κόνικλοι). Σε κάθε έναν από τους έξι κονίκλους έγινε ενδοϋαλοειδική έγχυση 1,25 mg (0,05 ml) Avastin στον δεξιό οφθαλμό. Όλοι οι κόνικλοι υπέστησαν ευθανασία στο τέλος του πρώτου μήνα. Ομάδα 2 (6 κόνικλοι). Σε κάθε έναν από τους έξι κονίκλους έγιναν δύο ενδοϋαλοειδικές εγχύσεις 1,25 mg (0,05 ml) Avastin με χρονική απόσταση ενός μηνός στον δεξιό οφθαλμό. Όλοι οι κόνικλοι υπέστησαν ευθανασία στο τέλος του δευτέρου μήνα. Ομάδα 3 (6 κόνικλοι). Σε κάθε έναν από τους έξι κονίκλους έγινε ενδοϋαλοειδική έγχυση 2 5 mg (0,1 ml) Avastin στον δεξιό οφθαλμό. Όλοι οι κόνικλοι υπέστησαν ευθανασία στο τέλος του πρώτου μήνα. Ομάδα 4 (6 κόνικλοι). Σε κάθε έναν από τους έξι κονίκλους έγιναν δύο ενδοϋαλοειδικές εγχύσεις 2,5mg (0,1 ml) Avastin με χρονική απόσταση ενός μηνός στον δεξιό οφθαλμό. Όλοι οι κόνικλοι υπέστησαν ευθανασία στο τέλος του δευτέρου μήνα. Ομάδα 5 (6 κόνικλοι). Σε κάθε έναν από τους έξι κονίκλους έγινε ενδοϋαλοειδική έγχυση 0,05ml φυσιολογικού ορού στον δεξιό οφθαλμό. Όλοι οι κόνικλοι υπέστησαν ευθανασία στο τέλος του δευτέρου μήνα. Στους αριστερούς οφθαλμούς όλων των ομάδων δεν έγινε καμία ένεση. Μετά τις ενδοϋαλοειδικές εγχύσεις όλοι οι κόνικλοι βρίσκονταν υπό στενή καθημερινή κλινική παρακολούθηση για την ύπαρξη τυχόν ανεπιθύμητων συμβαμάτων. Η προσεκτική καθημερινή κλινική εξέταση των κονίκλων δεν ανέδειξε κανένα ανεπιθύμητο συμβάν. Δεν διαπιστώθηκε η ύπαρξη καταρράκτη, θόλωσης του κερατοειδούς και αποκόλλησης του αμφιβληστροειδούς σε κανέναν από αυτούς. Επίσης, δεν διαπιστώθηκε κανένα σημείο φλεγμονής ή λοίμωξης όπως περικεράτια ένεση και πυώδεις εκκρίσεις σε κανέναν από όλους τους οφθαλμούς που εξετάσθηκαν. Όσον αφορά την ιστολογική αξιολόγηση όλων των οφθαλμών που έλαβαν μία ή δύο ενδοϋαλοειδικές εγχύσεις 1,25 mg και 2,5 mg bevacizumab (Avastin), αυτή δεν ανέδειξε καμία αξιόλογη ιστολογική μεταβολή σε όλα τα ανατομικά μέρη και σε όλα τα δείγματα που εξετάσθηκαν. Επιπρόσθετα, δεν ανιχνεύθηκαν καθόλου σημεία νέκρωσης και εκφύλισης του αμφιβληστροειδούς. Το πάχος δε αυτού του νευρικού χιτώνα διαπιστώθηκε ότι ήταν πρακτικά αμετάβλητο σε όλα τα δείγματα. Παράλληλα, σε κανέναν από τους αριστερούς οφθαλμούς των κονίκλων δεν αναδείχθηκαν ιστολογικές μεταβολές και αλλοιώσεις. Σε κάποια δείγματα των δεξιών οφθαλμών που έλαβαν ενέσεις αποκαλύφθηκαν χρονιές φλεγμονώδεις διηθήσεις αποτελούμενες από λεμφοκύτταρα, πλασματοκύτταρα και σπάνια ηωσινόφιλα. Σε έναν κόνικλο της ομάδας 2, σε έναν της ομάδας 3 και σε έναν της ομάδας 4 διαπιστώθηκαν χρόνιες φλεγμονώδεις διηθήσεις στο επίπεδο του στρώματος νευρικών ινών του αμφιβληστροειδούς. Σε δύο κονίκλους της ομάδας 1 και σε έναν της ομάδας 2 αποκαλύφθηκαν χρόνιες φλεγμονώδεις διηθήσεις εντοπισμένες γύρω από τον οπτικό δίσκο και την ίριδα. Στους αριστερούς οφθαλμούς των αντίστοιχων κονίκλων δεν διαπιστώθηκε καμία ιστολογική ανατομική μεταβολή. Τέλος, σε όλους τους υπολοίπους κονίκλους των ομάδων 1, 2, 3 και 4 καθώς και σε άπαντες της ομάδας 5 αναδείχθηκαν ανατομικά απολύτως φυσιολογικά παρασκευάσματα όπως υπέδειξε ο μικροσκοπικός έλεγχος σε όλες τις τομές αιματοξυλίνης-ηωσίνης.