Προσδιορισμός και μελέτη του αντιγόνου BM89 στο νευρικό σύστημα των θηλαστικών κατά την ανάπτυξη

Abstract

The aim of the present work was the study of the novel nervous system specific antigen BM89 by means of a monoclonal antibody. This antibody was generated by immunization of Balb/c mice with pig brain synaptic membranes. The biochemical characterization of the antigen shows that it is a 41kD polypeptide containing glycosylated epitopes and especially the L2/HNK-1 epitope shared by several recognition molecules. The immunochemical study of the antigen showed that it is expressed exclusively by neurons. By immunocytochemical methods we showed that the expression of the BM89 antigen is developmentally regulated in the rat nervous system. This expression profile reminds the profile of many recognition molecules. In addition the antigen is re-expressed on the surface of regenerating axons of the rat nervous system suggesting that it is involved in regeneration mechanisms. As showed by immunocytochemical studies in different cell cultures the antigen is expressed only by a subpopulation of neurons in the central and peripheral rat nervous system. Finally in the present work we identified and characterized a novel neuron specific glycoprotein which may be involved in recognition mechanisms during development.

H εργασία μας άφορα στη μελέτη ενός νευροειδικού μεμβρανικού αντιγόνου του ΒΜ89 με τη βοήθεια ενός μονοκλωνικού αντισώματος. Η παράγωγη του αντισώματος αυτού έγινε μετά από ανοσοποίηση ποντικών με μεμβρανικό παρασκεύασμα από εγκέφαλο νεογέννητου χοίρου. Η βιοχημική μελέτη του αντιγόνου ΒΜ89 έδειξε ότι πρόκειται για μια πολυπεπτιδική αλυσίδα 41Kd η οποία περιέχει γλυκοπρωτεϊνικούς επίτοπους και ειδικότερα τον επίτοπο L2/HNK-1 χαρακτηριστικό των μορίων κυτταρικής αναγνώρισης. Ανοσοϊστοχημικές μελέτες στο κεντρικό και περιφερικό νευρικό σύστημα του νεογέννητου χοίρου έδειξαν ότι το μονοκλωνικό αντίσωμα ΒΜ89 αναγνωρίζει αποκλειστικά νευρώνες. Με ανοσοϊστοχημικές χρώσεις σε ιστούς επίμυων διαφόρων ηλικιών δείχθηκε ότι η έκφραση του αντιγόνου ΒΜ89 μειώνεται με την αύξηση της ηλικίας. Το πρότυπο αυτό έκφρασης θυμίζει αρκετά το πρότυπο έκφρασης πολλών μορίων κυτταρικής αναγνώρισης. Με πειράματα τραυματισμού του ισχιακού νεύρου ενήλικου επίμυος αποδείχθηκε ότι το αντίγονο ΒΜ89 επανεκφράζεται στους αναγενώμενους νευράξονες του νευρικού συστήματος. Όπως έδειξαν χρώσεις ανοσοφθορισμού σε in vitro πρωτογενείς καλλιέργειες νευρώνων το αντίγονο ΒΜ89 εκφράζεται μονό από έναν υποπληθυσμό νευρικών κυττάρων. Συμπερασματικά στην παρούσα εργασία προσδιορίσθηκε με τη βοήθεια μονοκλωνικού αντισώματος μια νευροειδική γλυκοπρωτεΐνη με χαρακτηριστικά μορίου κυτταρικής αναγνώρισης που πιθανόν παίζει κάποιο ρολό σε διαδικασίες ανάπτυξης και αναγέννησης στο νευρικό σύστημα.