Μοριακή διερεύνηση, ταυτοποίηση και αξιολόγηση παραγόντων που εμπλέκονται στις αυτόματες αποβολές εμβρύων

Abstract

This study aimed to evaluate the expression of apoptotic, inflammatory, mitotic and viral markers that play a role in spontaneous abortions, in placental samples coming from first trimester abortions. Materials & Methods: We used 128 placental samples from spontaneous abortion cases which were the study group and 49 coming from normal full-term pregnancies which were the control group. In these samples indirect immunohistochemistry was performed in order to evaluate the expression levels of TNF-a, NF-κB, M30, TUNEL, PHH3 as well as the possible presence of HSV1, 2 and CMV. Expression of the biomarkers was evaluated using a semi-quantitive system while viral presence was evaluated with a binary system. Lastly, we performed statistical analysis using SPSS. Results: Expression of TNF-a, NF-κB, M30, TUNEL and PHH3 was found higher with statistical significance in the study group (p<0,001). Moreover, all of the positive cases for viral infection were found in the study group, while none positive cases for HSV or CMV were found in the control group. Furthermore, the more advanced stage of the pregnancy was correlated with statistical significance with higher levels of TNF-a (p<0,001), NF-κB (p<0,001), TUNEL (p<0,001), M30 (p=0,020) and PHH3 (p<0,001). On the other hand, higher age of women was correlated with statistical significance with higher expression levels of TNF-a (p<0,001), NF-κΒ (p<0,001), TUNEL (p<0,001), M30 (p<0,001) and PHH3 (p<0,001) while the method of abortion didn’t seem to correlate with the expression of the markers. Furthermore, presence of CMV seemed to correlate with statistical significance with higher levels of TNF-a (p=0,002), NF-κΒ (p=0,002), TUNEL (p=0,006) and PHH3 (p<0,001), while presence of HSV1 and 2 was correlated with statistical significance with higher levels of TNF-a (p=0,007), NF-κΒ (p=0,024), TUNEL (p=0,004), Μ30 (p<0,001) και PHH3 (p<0,001).Conclusion: In conclusion, this research proved a statistical significant correlation between higher levels of all tested biomarkers in spontaneous abortions, while a statistically significant correlation between viral presence and higher expression of the same markers was observed. However, more research is needed in order to investigate all the possible underlying mechanism that can lead to spontaneous abortions.

Η συγκεκριμένη ερευνητική εργασία είχε σκοπό την αξιολόγηση της έκφρασης μεμονωμένων αποπτωτικών, φλεγμονωδών, ιογενώνκαι μιτωτικών παραγόντων που εμπλέκονται στις αυτόματες αποβολές κατά τη διάρκεια του πρώτου τρίμηνου.Υλικά & Μέθοδοι: Για την επίτευξη του σκοπού μας χρησιμοποιήσαμε 128 δείγματα πλακούντα που είχαν αποβληθεί και 49 δείγματα πλακούντα προερχόμενα από τελειόμηνες φυσιολογικές κυήσεις, τα οποία αποτέλεσαν την ομάδα μελέτης και την ομάδα ελέγχου αντίστοιχα. Στα παραπάνω δείγματα διενεργήθηκε έμμεση ανοσοϊστοχημεία για την αξιολόγηση των επιπέδων έκφρασης των δεικτών: TNF-a, NF-κB, M30, TUNEL, PHH3 καθώς και τη πιθανή παρουσία των ιών HSV 1 και 2 και CMV. Η έκφραση των παραγόντων αξιολογήθηκε ημιποσοτικά, ενώ για τους ιούς χρησιμοποιήθηκε δυαδικό σύστημα αξιολόγησης. Στην συνέχεια, διενεργήθηκε στατιστική ανάλυση με χρήση του προγράμματος SPSS.Αποτελέσματα: Η έκφραση των TNF-a, NF-κB, M30, TUNEL και PHH3 φάνηκε υψηλότερη με στατιστική σημαντικότητα (p<0,001)στην ομάδα μελέτης. Παράλληλα, όλα τα θετικά για τους ιούς περιστατικά βρέθηκαν συγκεντρωμένα στην ομάδα μελέτης, ενώ κανένα θετικό για HSV ή CMV περιστατικό δεν βρέθηκε στην ομάδα των φυσιολογικών κυήσεων. Από τις κλινικοϊστοπαθολογικές παραμέτρους, τα προχωρημένα στάδια της κύησης συσχετίσθηκαν με στατιστική σημαντικότητα με εντονότερα επίπεδα τωνTNF-a (p<0,001), NF-κΒ (p<0,001), TUNEL (p<0,001), M30 (p=0,020) και PHH3 (p<0,001). Επιπλέον, η μεγαλύτερη ηλικία της μητέρας συσχετίσθηκε με στατιστική σημαντικότητα με υψηλότερη έκφραση των TNF-a (p<0,001), NF-κΒ (p<0,001),TUNEL (p<0,001),M30 (p<0,001) και PHH3 (p<0,001)ενώ,ο τρόπος αποβολής δεν εμφάνισε κάποια σύνδεση με την έκφραση των υπό μελέτη δεικτών. Επιπρόσθετα, η παρουσία του CMV βρέθηκε να αυξάνει με στατιστική σημαντικότητα τα επίπεδα έκφρασης των TNF-a (p=0,002), NF-kb (p=0,002), TUNEL (p=0,006) και PHH3 (p<0,001), ενώ η παρουσία των HSV1 και 2συσχετίσθηκε στατιστικώς σημαντικά με υψηλότερα επίπεδα των TNF-a (p=0,007), NF-κΒ (p=0,024), TUNEL (p=0,004), Μ30 (p<0,001) καιPHH3 (p<0,001).Συζήτηση: Συμπερασματικά, στη παρούσα εργασία παρατηρήθηκε αυξημένη έκφραση όλων των βιοδεικτών στην ομάδα μελέτης καθώς και μια ξεκάθαρη συσχέτιση μεταξύ της παρουσίας ιικών παραγόντων και αυξημένων επιπέδων των υπό μελέτη δεικτών. Παρόλα αυτά, περισσότερη έρευνα απαιτείται για την διερεύνηση των πιθανών παθογενετικών μηχανισμών που οδηγούν στις αυτόματες αποβολές.