ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΠΥΡΗΝΙΚΟΥ RNP-ΣΥΜΠΛΕΓΜΑΤΟΣ ΑΠΟ ΗΠΑΤΙΚΟ ΙΣΤΟ ΑΡΟΥΡΑΙΟΥ. ΜΟΡΦΟΛΟΓΙΚΗ-ΒΙΟΧΗΜΙΚΗ ΚΑΙ ΑΝΟΣΟΛΟΓΙΚΗ ΜΕΛΕΤΗ

Abstract

ΑΠΟ ΗΠΑΤΙΚΟΥΣ ΠΥΡΗΝΕΣ ΑΡΟΥΡΑΙΟΥ ΑΠΟΜΟΝΩΘΗΚΕ ΕΝΑ RNP-ΣΥΜΠΛΕΓΜΑ ΕΜΠΛΟΥΤΙΣΜΕΝΟ ΣΕΔΟΜΕΣ ΜΕΣΗΣ ΔΙΑΜΕΤΡΟΥ 200-250 Α, ΑΝΘΕΚΤΙΚΟ ΣΤΗ ΔΡΑΣΗ ΤΩΝ ΝΟΥΚΛΕΑΣΩΝ. ΟΙ ΔΟΜΕΣΕΜΦΑΝΙΖΟΥΝ ΣΥΝΤΕΛΕΣΤΗ ΚΑΘΙΖΗΣΗΣ > 80S ΣΕ ΓΡΑΜΜΙΚΗ ΚΛΙΣΗ ΣΑΚΧΑΡΟΖΗΣ, ΠΕΡΙΕΧΟΥΝΚΥΡΙΩΣ ΒΑΣΙΚΕΣ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΜΒ=130, 115, 78, 76 KD ΚΑΙ ΤΑ ΠΕΝΤΕ ΕΙΔΗ ΤΩΝ U-SURNAS (U1, U2, U4, U5, U6). ΣΕ ΙΣΟΠΥΚΝΙΚΗ ΚΛΙΣΗ, CSCL ΕΜΦΑΝΙΖΟΥΝ ΠΥΚΝΟΤΗΤΑ Ρ=1,3650. ΤΑ ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΚΑ ΔΕΔΟΜΕΝΑ ΚΑΙ ΤΑ ΠΙΟ ΠΑΝΩ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΠΑΡΕΧΟΥΝ ΑΡΚΕΤΕΣ ΕΝΔΕΙΞΕΙΣ ΓΙΑ ΤΗ ΣΧΕΣΗ ΤΩΝ ΔΟΜΩΝ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΕΓΜΑΤΟΣ ΜΕ ΤΑ ΕΝΔΟΧΡΩΜΑΤΙΝΙΚΑ ΚΟΚΚΙΑ ΤΟΥ ΠΥΡΗΝΑ. ΠΑΡΑΠΕΡΑ ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΠΙΟ ΠΑΝΩ ΣΧΕΣΗΣ ΕΓΙΝΕ ΜΕ ΤΗΝ ΠΑΡΑΓΩΓΗ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΕΝΑΝΤΙ ΤΩΝ ΔΟΜΩΝ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΕΓΜΑΤΟΣ. Ο ΟΡΟΣ ΠΟΥ ΠΡΟΕΚΥΨΕ (ΟΡΟΣ S2), ΠΑΡΟΥΣΙΑΖΕΙ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΣΗ ΕΙΔΟΥΣ ΚΑΙ ΔΙΝΕΙ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΚΥΡΙΩΣ ΜΕ ΤΟΥΣ ΠΥΡΙΝΙΣΚΟΥΣ ΕΝΩΠΑΡΑΛΛΗΛΑ ΔΙΝΕΙ ΣΤΙΚΤΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΣΤΟ ΝΟΥΚΛΕΟΠΛΑΣΜΑ. ΤΟ ΚΥΡΙΟ ΑΝΤΙΣΩΜΑ ΤΟΥ ΟΡΟΥ (ΑΝΤΙΣΩΜΑ Β), ΤΟ ΟΠΟΙΟ ΑΝΑΓΝΩΡΙΖΕΙ ΜΙΑ ΠΡΩΤΕΙΝΗ ΜΒ=94 KD, ΑΝΤΙΔΡΑ ΜΕ ΤΟΥΣ ΠΥΡΙΝΙΣΚΟΥΣ ΕΝΩ ΑΝΙΧΝΕΥΕΙ ΤΗ ΣΤΙΚΤΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΣΕ ΚΥΤΤΑΡΑ ΜΕΤΑ ΑΠΟ ΧΟΡΗΓΗΣΗ DRB. Η ΤΕΛΕΥΤΑΙΑ ΠΑΡΑΤΗΡΗΣΗ ΣΕ ΣΥΝΔΥΑΣΜΟ ΜΕ ΠΡΟΣΦΑΤΕΣ ΜΕΛΕΤΕΣ ΠΟΥ ΣΥΝΔΕΟΥΝ ΤΑ ΕΝΔΟΧΡΩΜΑΤΙΝΙΚΑ ΚΟΚΚΙΑ ΜΕ ΤΟΥΣ ΠΥΡΙΝΙΣΚΟΥΣ, ΕΝΙΣΧΥΕΙ ΤΗΝ ΑΠΟΨΗ ΟΤΙ ΟΙ ΔΟΜΕΣ ΤΟΥ ΣΥΜΠΛΕΓΜΑΤΟΣ ΤΑΥΤΙΖΟΥΝ ΜΕ ΤΑ ΕΝΔΟΧΡΩΜΑΤΙΝΙΚΑ ΚΟΚΚΙΑ ΤΟΥ ΠΥΡΗΝΑ.

A NOVEL RNP-COMPLEX HAS BEEN ISOLATED FROM RAT LIVER NUCLEI. IT IS HIGHLY ENRICHED IN STRUCTURES WITH MEAN DIAMETERS 200-250 A, RESISTANT TO THE ACTION OF NUCLEASE. THESE STRUCTURES SEDIMENT ON A SUCROSE GRADIENT AS >80 S COMPONENTS, AND THEY CONTAIN MAINLY BASIC PROTEINS OF MW=130, 115, 78, 76 KD AS WELL AS THE KNOWN U-SNRNA SPECIES (U1, U2, U4, U5, U6). THE STRUCTURES BAND AT P=1,3650 IN ISOPYARIC CSCL GRADIENT. THE ABOVE CHARACTERISTICS OF THIS RNP-COMPLEX TAKEN TOGETHER WITH RECENT FINDINGS IN THE LITERATURE, SUGGEST A POSSIBLE RELATIONSHIP BETWEEN INTERCHROMATIN GRANULES AND THE > 80 S STRUCTURES. FOLLOWING IMMUNIZATION OF RABBITS WITH THESE > 80 S STRUCTURES, WE HAVE OBTAINED A SERUM (SERUM S2), WHICH SHOWS SPECIES SPECIFICITY AND REACTS MAINLY WITH NUCLEOLI. THESERUM ALSO GIVES A SPECKLED PATTERN IN THE NUCLEOPLASM. THE MAJOR ANTIBODY OFSERUM S2 (ANTIBODY B), THAT RECOGNIZES A PROTEIN OF MW=94 KD, REACTS WITH THENUCLEOLI, BUT IT ALSO GIVES A SPECKLED PATTERN AFTER DRB TREATMENT OF THE CELLS. THIS LATTER OBSERVATION AND RECENT PUBLISHED DATA, WHICH CONNECT INTERCHROMATION GRANULES WITH NUCLEOLI, SUPPORT THE VIEW THAT THESE > 80 S RNP-STRUCTURES ARE INDEED THE INTERCHROMATION GRANULES OF THE NUCLEUS.