Η αλληλεπίδραση της φυσικής ανοσίας, των αιμοπεταλίων και του μορίου sCD40L σε ζωϊκό πρότυπο της σχετιζόμενης με κολίτιδα καρκινογένεσης του παχέος εντέρου

Abstract

We aimed to develop an animal model of colitis-associated colorectal cancer and determine the possible role of sCD40L in carcinogenesis by using the well-established azoxymethane/dextran sulfate sodium (AOM/DSS) protocol. Material and methods: Twelve Wild type (WT) and twelve TLR4 Knock out (KO) female C57BL6 mice were divided into 4 experimental groups. Six female C57BL6 WT and six female C57BL6 TLR4 KO mice were treated with a single intraperitoneal dose (10 mg/kg of body weight) of AOM followed by three 7-day cycles of oral 2.5 % DSS, with each cycle interrupted by a 2-week rest period. The other two groups included 6 WT and 6 TLR4 KO mice that received only water and characterized as the control groups. The mice of each group were sacrificed at 84 days. Results: All 6 animals of the WT group developed adenocarcinomas and from the TLR4 KO group 4 animals succumbed before the end of the procedures and the other 2 animals were protected from colorectal cancer. We measured the serum and pathologic tissue levels of sCD40L with quantitative sandwich enzyme-linked immunoassay (ELISA) and we aimed to check the hypothesis of a possible increased level of sCD40L in colitis associated cancer group. Conclusion: Higher levels of sCD40L in serum were associated with colitis associated cancer.

Σχεδιάσαμε την ανάπτυξη καρκίνου σχετιζόμενου με κολίτιδα και καθορίσαμε την πιθανή συμβολή του sCD40L στην καρκινογένεση, χρησιμοποιώντας το καθιερωμένο πρωτόκολλο AOM/DSS. Υλικά και μέθοδος: Δώδεκα Wild Type (WT) και δώδεκα TLR4 Knock Οut (KO) θηλυκά C57BL6 πειραματόζωα χωρίστηκαν σε τέσσερις ομάδες πειραματισμού. Έξι C57BL6 WT και έξι C57BL6 TLR4 KO πειραματόζωα έλαβαν ενδοπεριτοναική έγχυση ΑΟΜ (10 mg/kg) ακολουθούμενη από τρεις κύκλους των 7 ημερών DSS 2.5% w/v, σε κάθε κύκλο να μεσολαβεί μια περίοδος 14 ημερών ξεκούρασης με λήψη ύδατος. Οι άλλες δυο ομάδες πειραματισμού αποτέλεσαν τις ομάδες ελέγχου (control group), λαμβάνοντας μόνο πόσιμο ύδωρ. Τα πειραματόζωα θυσιάστηκαν μόλις ολοκλήρωσαν 84 ημέρες πειραματισμού. Αποτελέσματα: Το σύνολο των 6 WT πειραματοζώων ανέπτυξαν αδενοκαρκίνωμα παχέος εντέρου, ενώ από την ομάδα των TLR4 KO υπήρχε θανατηφόρος έκβαση για 4 πειραματόζωα και επέζησαν από τις διαδικασίες 2 πειραματόζωα τα οποία επέδειξαν προστασία στην καρκινογένεση. Η μέτρηση του sCD40L σε ορό και παθολογικό ιστό έγινε με την μέθοδο ELISA (quantitative sandwich enzyme-linked immunoassay) και προσπαθήσαμε να ελέγξουμε την κύρια υπόθεση της πιθανής αύξησης του sCD40L στο γκρουπ που ανέπτυξε καρκίνο. Συμπέρασμα: Υψηλότερα επίπεδα sCD40L στον ορό των πειραματοζώων συσχετίσθηκαν με ανάπτυξη καρκίνου σχετιζόμενου με κολίτιδα.