Ο ρόλος των MIR-1,MIR-133 και MIR-328 στην εμφάνιση της κολπικής μαρμαρυγής

Abstract

Atrial fibrillation (AF) following on-pump coronary artery bypass grafting (CABG) is a common condition associated with increased morbidity and mortality. We investigated the possibility that miRs may play a contributory role in postoperative AF and associated apoptosis. A total of 42 patients (31 males and 11 females, mean age 65.0 ± 1.3 years) with sinus rhythm and without a history of AF were prospectively enrolled. We examined the levels of the muscle-specific miR-1 (pro-apoptotic) and miR-133A (anti-apoptotic), as well as markers of apoptosis including caspase-3 activation, Bcl2 (antiapoptotic) and Bax (proapoptotic) mRNAs in right atrial appendage (RAA) biopsies and blood plasma taken before aortic cross-clamping and after reperfusion. miRs, BCL2 and BAX were determined by real-time RT-PCR and tissue caspase 3 activity by EnzChek Caspase-3 assay kit.After reperfusion, indices of apoptosis increased the RAA. There was no change in tissue or plasma miR-1 and miR-133A levels compared to pre CABG. However, in patients who postoperatively developed AF (n=14, 7 males and 7 females), compared to patients that remained in SR (n=28, 24 males and 4 females) post CABG, tissue miR-1 increased whereas miR-133A decreased and negatively correlated with RAA apoptosis. In postoperative AF, differential regulation of miR-1 and miR-133A in the RAA, may contribute to postoperative apoptosis. These results provide new insights into molecular mechanisms of postoperative AF with potential therapeutic implications.

Η κολπική μαρμαρυγή που εμφανίζεται μετά την αορτοστεφανιαία παράκαμψη (CABG) είναι σχετικά συχνή κατάσταση και σχετίζεται με αυξημένη νοσηρότητα και θνησιμότητα. Το ενδεχόμενο τα microRNAs (miRs) να διαδραματίζουν κάποιο ρόλο στην εμφάνιση της μετεγχειρητικής κολπικής μαρμαρυγής δεν έχει πλήρως διερευνηθεί. Στη μελέτη αυτή, θα επιχειρήσουμε να αναγνωρίσουμε miRs που πιθανόν να παίζουν ρόλο στην εμφάνιση μετεγχειρητικής AF και την σχετιζόμενη με αυτήν απόπτωση. Στην μελέτη συμμετείχαν 42 ασθενείς (31 άνδρες και 11 γυναίκες, μέση ηλικία 65.0 ± 1.3 έτη) με φλεβοκομβικό ρυθμό και χωρίς ιστορικό κολπικής μαρμαρυγής. Μελετήσαμε τα επίπεδα των ειδικών για το μυϊκό ιστό miR-1 (προαποπτωτικό) και miR-133Α (αντιαποπτωτικό), καθώς και δείκτες της απόπτωσης, συμπεριλαμβανομένου του αντιαποπτωτικού BCL2 mRNA και του πρωαποπτωτικού BAX mRNA, καθώς και την δραστικότητα της κασπάσης-3, σε βιοψίες από το ωτίο του δεξιού κόλπου (RAA) και στο πλάσμα αίματος που λήφθηκαν πριν τον αποκλεισμό της ανιούσης αορτής (cross-clamping) και μετά την επαναιμάτωση. Τα επίπεδα των miRs, των BCL2 και BAX mRNAs καθορίστηκαν με ποσοτική real-time RT-PCR και η δραστικότητα της ιστικής κασπάσης -3 με το EnzChek Caspase-3 assay kit. Μετά την επαναιμάτωση οι αποπτωτικοί δείκτες παρουσίασαν αύξηση στον κολπικό ιστό. Δεν υπήρξε αλλαγή στα επίπεδα των miR του ιστού ή του πλάσματος συγκριτικά με τα επίπεδα τους πριν την CABG. Ωστόσο στους ασθενείς που εμφάνισαν μετεγχειρητική AF (η=14, 7 άνδρες και 7 γυναίκες) σε σχέση με αυτούς που παρέμειναν σε SR (η=28, 24 άνδρες και 4 γυναίκες) μετά την CABG, το ιστικό miR-1 παρουσίασε αύξηση της έκφρασής του ενώ το miR-133A μείωση. Στην μετεγχειρητική AF, η διαφοροποίηση της έκφρασης των miR-1 και miR-133A στο κολπικό ιστό μπορεί να συνεισφέρει στην αύξηση της μετεγχειρητικής απόπτωσης. Τα αποτελέσματα αυτά δίνουν νέα δεδομένα στους μοριακούς μηχανισμούς της μετεγχειρητικής AF, με πιθανές μελλοντικές θεραπευτικές παρεμβάσεις.