Ανοσοϊστοχημική διερεύνηση της έκφρασης των κυτοκινών tnf-α, il-6 και il-1β σε γιγαντοκυτταρικά κοκκιώματα της στοματογναθοπροσωπικής περιοχής

Abstract

The aim of the present study was to evaluate the immunohistochemical expression of cytokines tnf-a, il-6 and il-1b in peripheral (pgcg) and central (cgcg) giant cell granulomas of the jaws in order to detect possible differences between: - pgcg and cgcg considering the expression of each of these cytokines. - multinucleated giant cells and stromal spindle-shaped cells of the lesions considering the expression of each of these cytokines. - tnf-a, il-6 and il-1b considering their expression by the two cell populations of gcgs. the material of the present study consisted of 40 cases of pgcg and 40 cases of cgcg. Histologic sections of formalin fixed paraffin-embedded tissues were immunohistochemically stained using the anti-tnf-a, anti-il-6 and anti-il-1b antibodies. In each section, four high-power fields were randomly selected and in each field the proportion of stained cells (pp) and the intensity of overall staining (si) were evaluated. The score of the pp for each field was multiplied by the score of si in that field to provide a combined immunoreactivity score value (irs) for the field. The mean of the four fields was the irs score for the sample. Statistical analysis was performed using the non-parametric mann-whitney and wilcoxon tests, using spss 13.0 software and the differences were considered as statistically significant at level p=0.05 <http://www.sciencedirect.com/science?_ob=MathURL&_method=retrieve&_udi=B7GW5-4H68NXR-5&_mathId=mml7&_user=2403047&_cdi=20449&_rdoc=1&_ArticleListID=332871517&_acct=C000059642&_version=1&_userid=2403047&md5=ad7b725640c5a914a0120041a7b0feae>. The following conclusions were obtained by the results of this study: 1. Tnf-a, il-6 and il-1b are expressed by the cells of pgcg and cgcg. 2. There was no statistically significant difference between pgcg and cgcg considering the expression of tnf-a and il-6 by giant cells, while higher expression of the cytokines by stromal spindle-shaped cells was observed in cgcg. Considering the expression of il-1b, higher expression of this cytokine by giant cells was observed in cgcg and higher expression of this cytokine by stromal spindle-shaped cells was observed in pgcg. 3. In both pgcg and cgcg, the giant cells demonstrated higher expression of these cytokines in comparison to spindle-shaped cells. 4. No difference was detected between tnf-a and il-6 considering their expression by the two cell populations in pgcg and cgcg. In contrary, in comparison to tnf-a and il-6, higher expression of il-1b by giant cells and lower expression of the cytokine by spindle-shaped cells was observed in both cell populations in pgcg and cgcg. The findings of the present study indicate that tnf-a, il-1b and il-6 may be involved in the pathogenesis of the giant cell granulomas of the jaws.

Σκοπος της παρουσας μελετης ηταν να διερευνηθει η ανοσοϊστοχημικη εκφραση των κυτοκινων tnf-α, il-6 και il-1β απο τα κυτταρα περιφερικων (πγκ) και κεντρικων (κγκ) γιγαντοκυτταρικων κοκκιωματων των γναθων και να διαπιστωθει τυχον διαφορα μεταξυ: i. Πγκ και κγκ οσον αφορα στην εκφραση καθε μιας απο τις παραπανω κυτοκινες. Ii. Των δυο επιμερους κυτταρικων πληθυσμων (πολυπυρηνα γιγαντοκυτταρα και ενδιαμεσα μονοπυρηνα ατρακτομορφα κυτταρα) ως προς την εκφραση καθε μιας απο τις παραπανω κυτοκινες. Iii. Των tnf-α, il-6 και il-1β οσον αφορα στην εκφραση τους απο τα κυτταρα των γιγαντοκυτταρικων κοκκιωματων. Υλικο της παρουσας μελετης αποτελεσαν 40 περιπτωσεις πγκ και 40 περιπτωσεις κγκ. Ιστολογικες τομες παραφινης χρησιμοποιηθηκαν για την ανοσοχρωση με τα αντισωματα anti-tnf-α, anti-il-6 και anti-il-1β. Συνολικα εξεταστηκαν 240 ιστολογικες τομες, 80 για καθε αντισωμα. Σε καθε τομη καθοριστηκαν 4 περιοχες αξιολογησης (οπτικα πεδια). Σε καθε περιοχη αξιολογηθηκαν ως προς την ανοσοχρωση τους για το συγκεκριμενο αντισωμα δυο κυτταρικοι πληθυσμοι (πολυπυρηνα γιγαντοκυτταρα, ενδιαμεσα μονοπυρηνα ατρακτομορφα κυτταρα). Στο εκαστοτε οπτικο πεδιο κατεγραφη: (ι) το ποσοστο των θετικα ανοσοχρωσμενων κυτταρων καθε κυτταρικου πληθυσμου (pp) και (ιι) η ενταση της ανοσοχρωσης για καθε κυτταρικο πληθυσμο (si). Η συνολικη ανοσοαντιδραση irs για καθε κυτταρικο πληθυσμο του εκαστοτε πεδιου υπολογιστηκε ως το γινομενο ppxsi. Ο μεσος ορος των irs των 4 οπτικων πεδιων της ιστολογικης τομης αποτελεσε την τιμη της ανοσοαντιδρασης irs για τον συγκεκριμενο κυτταρικο πληθυσμο. Λογω της ασυμετρης κατανομης της irs των κυτοκινων που μελετηθηκαν, για τη συγκριση των κατανομων χρησιμοποιηθηκαν οι μη-παραμετρικες δοκιμασιες των mann-whitney και wilcoxon. Η στατιστικη αναλυση πραγματοποιηθηκε με τη χρηση του πακετου εργαλειων στατιστικης αναλυσης δεδομενων spss 13.0. Ως επιπεδο στατιστικης σημαντικοτητας οριστηκε το ρ=0,05. Η αναλυση των ευρηματων της παρουσας μελετης οδηγησε στα εξης συμπερασματα: 1. Ο tnf-α, η il-6 και η il-1β εκφραζονται απο τα κυτταρα των πγκ και των κγκ και θεωρειται πιθανη η συμμετοχη τους στους οστεολυτικους μηχανισμους που εμπλεκονται στην παθογενεια των βλαβων αυτων 2. Οι δυο κλινικες μορφες γιγαντοκυτταρικων κοκκιωματων δεν διαφερουν μεταξυ τους ως προς την εκφραση του tnf-α και της il-6 απο τα γιγαντοκυτταρα, ενω διαφερουν ως προς την εκφραση του tnf-α και της il-6 απο τα ατρακτομορφα κυτταρα. Συγκεκριμενα, οι κυτοκινες αυτες παρουσιαζουν αυξημενη εκφραση στα κγκ σε συγκριση με τα πγκ. Οσον αφορα στην εκφραση της il-1β απο τα γιγαντοκυτταρα ειναι μεγαλυτερη στα κγκ σε συγκριση με τα πγκ, ενω η εκφραση της il-1β απο τα ατρακτομορφα κυτταρα ειναι μεγαλυτερη στα πγκ 3. Τα γιγαντοκυτταρα εμφανιζουν αυξημενη εκφραση και των τριων κυτοκινων σε σχεση με τα ατρακτομορφα κυτταρα τοσο στα πγκ οσο και στα κγκ 4. Οι κυτοκινες tnf-α και il-6 δεν διαφερουν μεταξυ τους ως προς την εκφραση τους απο τα κυτταρα των γιγαντοκυτταρικων κοκκιωματων. Σε αντιθεση, η il-1β, σε σχεση με τις δυο αλλες κυτοκινες, παρουσιαζει μεγαλυτερη εκφραση απο τα γιγαντοκυτταρα και μικροτερη απο τα ατρακτομορφα τοσο στα πγκ οσο και στα κγκ .