Ο προστατευτικός ρόλος των μακρολιδών στο επιθήλιο των αεραγωγών κουνελιού

Abstract

Macrolides have been proven to have beneficial bacteriostatic and anti-inflammatory properties, but very little is known about the potential value of their bronchodilatory effect. Therefore, in the present study we investigated the effect of azithromycin on contractile responses of isolated rabbit tracheal strips to carbachol or KCl. Azithromycin has a relaxant, concentration-dependent effect on tracheal strips precontracted with carbachol (300 nM), significant from the concentration of 1 μΜ. The mechanical removal of epithelium did not alter the effect of azithromycin. Azithromycin (100 μΜ) also relaxed tracheal strips precontracted with KCl (80 mM) even in the presence of atropine (100 μΜ). Moreover, azithromycin (100 μΜ) decreased contractions induced by 300 nM and 10 μΜ carbachol to 55.4% and 80.5% of initial contraction, respectively. The relaxant effect of azithromycin persisted in both calcium free solution and in the presence of the calcium channel antagonist, verapamil. The relaxant effect of azithromycin was not altered by the pre-treatment of preparations with the inhibitors of Ca2+-ATPase (cyclopiazonic acid), Na+-K+ ATPase (ouabain), Rho-associated kinase [(R)-(+)-trans-4-(1-Aminoethyl)-N-(4-Pyridyl)cyclohexanecarboxamide dihydrochloride] (Y-27632) or the non-specific cAMP and cGMP phosphodiesterases inhibitor 3-Isobutyl-1-methyl-2,6(1H,3H)-purinedione (IBMX). These results suggest that azithromycin has a concentration-dependent, epithelium-independent, direct relaxant effect on precontracted tracheal strips that is not mediated via inhibition of Ca2+ influx or Ca2+ release from intracellular stores. Also, it is not due to alteration of the function of Na+-K+ ATPase and does not depend on the formation of cAMP/cGMP or the Rho/ Rho-activated kinase pathway.

ΕΙΣΑΓΩΓΗ: Η αντιμικροβιακή και αντιφλεγμονώδης δράση των μακρολιδών είναι καλά τεκμηριωμένες, ενώ λίγα είναι γνωστά για το βρογχοδιασταλτικό τους ρόλο. ΣΚΟΠΟΣ ΤΗΣ ΜΕΛΕΤΗΣ: Η διερεύνηση της δράσης της αζιθρομυκίνης στον τόνο των λείων μυϊκών ινών (ΛΜΙ) αεραγωγών που βρίσκονται σε σύσπαση με καρβαχόλη (300nM ) ή KCl (80mM). ΥΛΙΚΟ ΚΑΙ ΜΕΘΟΔΟΙ: Έγιναν in vitro πειράματα συστολών σε παρασκευάσματα ΛΜΙ τραχείας ενήλικων κουνελιών. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ: Η αζιθρομυκίνη (1μM-100μΜ) προκάλεσε χάλαση των, σε σύσπαση με καρβαχόλη, ΛΜΙ. Ενδεικτικά, 100μΜ αζιθρομυκίνη ελαττώνουν την τάση των ΛΜΙ στο 55.4% της αρχικής σύσπασης. Επιπλέον, η αζιθρομυκίνη (1 μΜ και 100μΜ) ελάττωσε την ανταποκρισιμότητα των ΛΜΙ σε 300nM ή 10 μΜ καρβαχόλης. Η αφαίρεση του επιθηλίου δεν επηρέασε τη δράση της αζιθρομυκίνης. Η αζιθρομυκίνη (100 μΜ) προκάλεσε χάλαση των ΛΜΙ που βρίσκονταν σε σύσπαση με KCl, ακόμα και παρουσία ατροπίνης (100μΜ). Η δράση της αζιθρομυκίνης παρατηρήθηκε απουσία ασβεστίου από το υγρό διαπότισης του ιστού, παρουσία του ανταγωνιστή διαύλων ασβεστίου, βεραπαμίλη. Επίσης, η ανασταλτική της δράση δεν επηρεάστηκε από την προεπώαση των ΛΜΙ με αναστολείς της Ca2+-ATPάσης (κυκλοπιαζονικό οξύ), Na+-K+ ATPάσης (ουαμπαϊνη), Rho-εξαρτώμενης κινάσης [(R)-(+)-trans-4-(1-αμινοαιθυλ)-N-(4-πουριδυλ) διυδροχλώριδο κυκλοεξανοκαρβοξαμίδη] ή με τον μη ειδικό αναστολέα των cAMP/GMP φωσφοδιεστερασών [3-Ισοβουτυλ-1-μεθυλο-2,6(1H,3H)-πουρινεδιόνη]. ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ: Τα αποτελέσματα της μελέτης δείχνουν ότι η αζιθρομυκίνη ασκεί δοσοεξαρτώμενη, επιθηλιο-ανεξάρτητη, άμεση ανασταλτική δράση στις προσυσπασμένες ΛΜΙ τραχείας κουνελιού. Η δράση αυτή της αζιθρομυκίνης δεν οφείλεται σε αναστολή εισόδου Ca2+ στις ΛΜΙ ή σε παρεμπόδιση απελευθέρωσης Ca2+ από τις ενδοκυττάριες αποθήκες. Επίσης, στον μηχανισμό δράσης της δεν εμπλέκεται η Na+-K+ ATPάση, ο σχηματισμός cAMP/cGMP ή το μονοπάτι Rho/Rho-εξαρτώμενης κινάσης.